复合抗菌肽“态康利保”对山羊瘤胃纤毛虫种群结构及常见纤毛虫数量的影响

发布时间：2023-06-01 04:47

　　抗菌肽由于其广谱抗菌活性,不易产生耐药性等特性而倍受关注,开发为新型饲料添加剂,已应用于猪、禽等动物,但在反刍动物的应用研究还鲜有报道。本研究运用高通量测序技术与实时荧光定量PCR技术比较分析复合抗菌肽“态康利保”对山羊瘤胃纤毛虫群落结构及常见纤毛虫数量的影响及其与精料量的关系,为复合抗菌肽“态康利保”作为饲料添加剂应用于反刍动物提供理论依据。试验选取24只4月龄体重相近(16.17±0.72)kg临床健康雄性川中黑山羊,随机分为4组,每组6只。Ⅰ组(正常精料组)饲喂正常量精料300 g·d^-1·goat^-1,Ⅱ组(正常量精料+抗菌肽组)饲喂正常量精料+态康利保3 g·d^-1·goat^-1,Ⅲ组(双倍精料组)饲喂精料600 g·d^-1·goat^-1;Ⅳ组(双倍精料+抗菌肽组)饲喂双倍精料+态康利保3g·d^-1·goat^-1,连续饲喂60 d。于试验第0 d,20 d和60 d每组随机选取3只山羊采集瘤胃液样品50...

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
英文缩写词表
第一章 文献综述
    1.1 抗菌肽研究进展
        1.1.1 抗菌肽简介
        1.1.2 抗菌肽广谱抗微生物作用
        1.1.3 抗菌肽作为饲料添加剂的研究现状
        1.1.4 抗菌肽作为饲料添加剂对肠道菌群的影响
    1.2 瘤胃纤毛虫研究进展
        1.2.1 瘤胃纤毛虫简介
        1.2.2 瘤胃纤毛虫生物学意义
        1.2.3 瘤胃纤毛虫种群结构研究进展
        1.2.4 分子生物学手段在瘤胃微生物研究中的应用
    1.3 研究目的及意义
第二章 复合抗菌肽对山羊瘤胃纤毛虫种群结构的影响
    2.1 试验材料与动物
        2.1.1 试验药品
        2.1.2 试验仪器与试剂
        2.1.3 试验动物
    2.2 试验方法
        2.2.1 试验动物的饲养管理
        2.2.2 试验动物的分组及处理
        2.2.3 瘤胃液的采集和基因组DNA的提取
        2.2.4 18S rDNA的扩增及MiSeq测序
        2.2.5 数据分析
    2.3 结果
        2.3.1 瘤胃细菌总DNA提取结果
        2.3.2 样品测序深度
        2.3.3 Alpha多样性分析
        2.3.4 Beta多样性分析
        2.3.5 纤毛虫种群结构分析
    2.4 讨论
        2.4.1 多样性分析
        2.4.2 复合抗菌肽对纤毛虫种群结构的影响
    2.5 小结
第三章 复合抗菌肽对山羊瘤胃内常见纤毛虫数量的影响
    3.1 试验材料与动物
        3.1.1 试验药品
        3.1.2 试验仪器与试剂
        3.1.3 试验动物
    3.2 试验方法
        3.2.1 试验动物的饲养管理
        3.2.2 试验动物的分组及处理
        3.2.3 瘤胃液的采集和细菌基因组DNA的提取
        3.2.4 测定指标
        3.2.5 引物设计
        3.2.6 目的基因的扩增、鉴定及回收
        3.2.7 标准品的制备
        3.2.8 标准曲线的建立及Real-timePCR扩增
        3.2.9 数据分析
    3.3 结果
        3.3.1 纤毛虫总数
        3.3.2 目的基因片段克隆鉴定
        3.3.3 阳性克隆测序结果及相似性分析
        3.3.4 标准曲线的建立
        3.3.5 荧光定量PCR扩増与熔解曲线
        3.3.6 荧光定量结果
    3.4 讨论
    3.5 小结
结论
参考文献
致谢
附录
    附录Ⅰ瘤胃液基因组DNA的提取
    附录Ⅱ PCR产物与载体的连接转化
作者简历



本文编号：3826651