泰安渿河中产ESBLs大肠杆菌耐药性及耐药基因的传递规律初步探究

发布时间：2023-08-11 18:54

　　大肠杆菌作为一种条件致病菌,其数量庞大,广泛分布于自然界中,可引起人和动物泌尿系统感染、败血症等。临床上,β-内酰胺类药物被作为治疗细菌性感染疾病的重要选择,其滥用致使产超广谱β-内酰胺酶(Extended-Spectrumβ-Lactamases,ESBLs)大肠杆菌的出现,其耐药性强,且耐药基因能够由质粒介导发生水平传递,因此,其危害值得关注。水环境作为耐药基因获得、传递及储存的理想环境,同时,水也是其污染源头、载体及抗菌药物滥用的承担者;人类开放性伤口一旦通过与水体接触被水中产ESBLs菌株感染,将导致预防和治疗上的极大困难,因此,其研究意义不容小觑。城市河流是贯穿城区、与人们生活息息相关的城市河流水环境以及水质情况,对维护城市公共卫生安全具有尤为重要的意义。本研究为调查城市河流-泰安市渿河(贯穿城区)中产ESBLs大肠杆菌的流行情况、耐药性及其耐药性传递规律。于2018年3-5月,从泰安地区城市河流-渿河,采集272份河水样品,通过药物筛选培养基培养,PCR扩增,双纸片表型确证试验,分离鉴定产ESBLs大肠杆菌;通过平板凝集试验对其进行特定血清型O157:H7检测。选取当地人医...

【文章页数】：89 页

【学位级别】：硕士

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符号说明
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 大肠杆菌基本概况
    1.2 抗生素
        1.2.1 抗生素的污染现状
        1.2.2 β-内酰胺类抗生素
    1.3 耐药性
        1.3.1 耐药性分类
        1.3.2 耐药机制
        1.3.3 抗性基因的转移特点
    1.4 ESBL定义与类别
        1.4.1 ESBL类别
            1.4.1.1 TEM型
            1.4.1.2 SHV型
            1.4.1.3 CTX-M型
            1.4.1.4 OXA型
            1.4.1.5 其它类型ESBLs
        1.4.2 ESBL表型检测方法
            1.4.2.1 表型确证试验
            1.4.2.2 双纸片扩散法
            1.4.2.3 克拉维酸法琼脂法
            1.4.2.4 E-test法
    1.5 大肠杆菌分子分型方法
        1.5.1 脉冲场凝胶电泳
        1.5.2 多位点序列分型
            1.5.2.1 ST131 型大肠杆菌
        1.5.3 肠杆菌基因间重复共有序列
        1.5.4 多位点可变重复序列分析
    1.6 临床常用治疗方法
    1.7 水环境中的耐药基因
    1.8 耐药性研究新视角
    1.9 本研究目的及意义
2 材料及方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 试验中所用菌株
        2.1.2 试验所用试剂及试剂配制
        2.1.3 试验所用主要仪器
    2.2 试验方法
        2.2.1 泰安市渿河中产ESBLs大肠杆菌的流行情况
            2.2.1.1 样品的来源及采集与处理
            2.2.1.2 大肠杆菌分离鉴定方法
            2.2.1.3 产ESBLs大肠杆菌确证试验
            2.2.1.4 大肠杆菌O157:H7 血清型测定
        2.2.2 泰安市渿河中产ESBLs大肠杆菌耐药性研究
            2.2.2.1 耐药表型试验
            2.2.2.2 耐药基因的检测方法
            2.2.2.3 I类整合子检测
        2.2.3 产ESBLs大肠杆菌分型研究
            2.2.3.1 ERIC-PCR分型方法
            2.2.3.2 多位点序列分型方法
        2.2.4 产ESBLs大肠杆菌耐药性传递的研究
            2.2.4.1 接合试验
            2.2.4.2 接合子初步筛选标准
            2.2.4.3 疑似接合子鉴定试验
            2.2.4.4 接合子结果分析
            2.2.4.5 接合子耐药表型检测方法
            2.2.4.6 接合子耐药基因检测方法
3 结果与分析
    3.1 泰安市渿河中产ESBLs大肠杆菌的流行情况
        3.1.1 泰安渿河中大肠杆菌的分离鉴定结果
        3.1.2 产ESBLs表型确证结果
        3.1.3 大肠杆菌O157:H7 血清型测定结果
    3.2 泰安市渿河中产ESBLs大肠杆菌耐药性研究结果
        3.2.1 耐药表型结果
        3.2.2 耐药基因测定结果
        3.2.3 部分耐药基因与耐药表型相关性分析
        3.2.4 I类整合子检测结果
    3.3 产ESBLs大肠杆菌ERIC及 MLST分型结果
        3.3.1 MLST多位点序列分型结果
        3.3.2 构建最小生成树分析结果
        3.3.3 ST型与国内人源大肠杆菌ST型对比分析
        3.3.4 MLST、耐药表型、耐药基因、I类整合子列表综合分析
        3.3.5 ERIC-PCR分型结果
    3.4 产ESBLs大肠杆菌耐药性传递的研究结果
        3.4.1 接合试验结果
        3.4.2 接合子耐药表型测定
        3.4.3 接合子耐药基因转移结果
4 讨论
    4.1 泰安城市河流—渿河河水中产ESBLs大肠杆菌的流行情况
    4.2 河水中产ESBLs大肠杆菌耐药性及耐药基因分析
    4.3 ERIC分型与MLST分型
    4.4 体外耐药性传递的研究
5 结论
6 创新点
参考文献
致谢
研究生期间发表的文章



本文编号：3841576