围产期山羊子宫颈糖皮质激素受体、合成酶定位及脂肪细胞定位研究

发布时间：2023-09-17 13:05

　　糖皮质激素是哺乳动物分娩启动的重要激素，不仅可以引起子宫收缩力的改变，通过多种途径参与分娩，而且在分娩启动时各种激素间相互协调中发挥着枢纽作用。它主要由肾上腺皮质分泌，现已证明其他部位如胎盘、卵巢、子宫等组织器官也可分泌，包括皮质醇和皮质酮，牛、羊等所分泌的90%以上是皮质醇。糖皮质激素必须与其受体相结合才能发挥作用。糖皮质激素受体分为GRα和GRβ，主要以GRα形式存在。参与糖皮质激素活性转化的酶类主要是11β-羟基类固醇脱氢酶（11β-HSD）。11β-HSD分为11β-HSD1、11β-HSD2两种。11β-HSD1是氧化还原酶，以还原作用为主，可使无活性的可的松还原为有活性的皮质醇。11β-HSD2是专一性氧化酶，使有生物活性的皮质醇转变为无活性的可的松。 目前国内外就糖皮质激素受体、合成酶在围产期山羊子宫颈中的定位以及mRNA表达与分娩前后子宫颈收缩和舒张的关系是否一致的研究较少，资料仍然缺乏。为了阐述上述问题，本试验分别采集健康山羊产前两天、产前一天、分娩期、产后一天以及产后两天的子宫颈，用Western Blot法检测兔抗人糖皮质激素受体蛋白（NR3C1）多克隆抗体，兔抗...

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符号说明
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 糖皮质激素概述
        1.1.1 糖皮质激素的合成
        1.1.2 糖皮质激素的生理作用
        1.1.3 糖皮质激素分泌的调节
    1.2 糖皮质激素受体概述
        1.2.1 糖皮质激素受体的结构与分类
        1.2.2 糖皮质激素受体的分布
        1.2.3 糖皮质激素受体的作用机理
        1.2.4 糖皮质激素受体的生理作用
    1.3 糖皮质激素合成酶概述
        1.3.1 11β-HSD1 与 11β-HSD2 的研究简史
        1.3.2 11β-HSD1 与 11β-HSD2 的基因结构特点
        1.3.3 11β-HSD1 与 11β-HSD2 的分布及功能
        1.3.4 11β-HSD 的调节
    1.4 脂肪细胞
        1.4.1 脂肪细胞的分类与功能
        1.4.2 脂肪细胞的形成
2 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 试验动物
        2.1.2 试验药品与试剂
        2.1.3 试验仪器设备
        2.1.4 主要试剂配制
    2.2 试验方法
        2.2.1 试验动物的饲养
        2.2.2 试验动物子宫颈样本的采集
        2.2.3 Western Βlot 法检测兔抗人 NR3C1 抗体，兔抗人 11β-HSD1 抗体及兔抗人 11β-HSD2抗体在山羊子宫颈组织中的特异性
        2.2.4 免疫组织化学方法检测 NR3C1、11β-HSD1、11β-HSD2 和脂肪细胞在围产期山羊子宫颈组织中的分布
        2.2.5 荧光定量 RT-PCR 方法检测围产期山羊子宫颈组织中的 NR3C1、11β-HSD1 及11β-HSD2 的相对表达水平
3 结果与分析
    3.1 Western Blot 法检测围产期山羊子宫颈兔抗人 NR3C1 抗体、11β-HSD1 抗体、11β-HSD2 抗体的特异性
    3.2 围产期山羊子宫颈中脂滴的分布
    3.3 围产期山羊子宫颈中 NR3C1 受体蛋白及合成酶 11β-HSD1、11β-HSD2 的分布
    3.4 围产期山羊子宫颈组织的荧光定量 RT-PCR 检测结果
        3.4.1 所有组织样本总 RNA 提取的完整性和纯度以及荧光定量 RT-PCR 的重复性检验
        3.4.2 用 RT-PCR 方法得到的扩增产物的特异性检验
        3.4.3 实时荧光定量 RT-PCR 扩增 NR3C1、11β-HSD1、11β-HSD2 及 ACTΒ内参基因片段产物的扩增曲线
        3.4.4 围产期山羊各期子宫颈组织 RT-PCR 方法检测目的基因的表达效果
4 讨论
5 结论
6 参考文献
7 致谢
8 作者简介及发表论文情况



本文编号：3847481