低蛋白日粮添加蛋氨酸对泌乳小鼠乳蛋白合成的影响

发布时间：2023-09-17 19:45

　　氨基酸不仅是蛋白质合成的底物,而且能够作为生物信号直接调控蛋白质的合成。本团队前期试验表明,在低蛋白日粮条件下,补饲过瘤胃Met或同时补饲4种过瘤胃必需氨基酸Met,Leu,Ile和Thr均能够显著提高奶牛乳产量、乳蛋白合成量以及氮泌乳转化效率。但Met通过何种途径起作用,目前尚不明确。本文以泌乳小鼠为模型,研究Met对泌乳小鼠乳产量、乳蛋白合成的影响及影响途径,以期为信号氨基酸调控理论积累数据,并为研究在奶牛上有推广价值的补饲方案提供试验依据。试验选取48只分娩日期相近(17¹9d)的SPF昆明清洁级雌性孕小鼠,随机分为4个处理组,每组12只,单笼饲喂。从分娩当天开始分别饲喂四种日粮:低蛋白日粮(LP,日粮蛋白水平为16%),高蛋白日粮(HP,日粮蛋白水平为21%),低蛋白日粮添加1倍Met(M1,添加1.86 g Met)或2倍Met(M2,添加3.72 g Met)。日粮等能配制,饲喂17天,观察对泌乳小鼠采食量、仔鼠窝增重、乳蛋白产量、血浆AA浓度、激素浓度以及乳腺mTOR信号通路的影响。试验结果表明,HP组、LP组、M1组和M2组之间泌乳小鼠的采食量、仔...

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

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符号说明
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 泌乳奶牛氮转化效率
        1.1.1 蛋白质与氨基酸平衡理论
        1.1.2 奶牛氮利用效率
    1.2 日粮补饲蛋氨酸的研究进展
    1.3 乳蛋白质的合成
        1.3.1 乳腺结构与发育
        1.3.2 乳蛋白的合成
    1.4 影响乳蛋白合成的因素
        1.4.1 营养因素
            (1)能量水平
            (2)蛋白质水平
            (3)氨基酸
        1.4.2 内分泌因素
    1.5 调控乳蛋白合成的信号途径
    1.6 研究目的意义及研究内容
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 试验动物
        2.1.2 主要试验仪器
        2.1.3 主要试验试剂
        2.1.4 主要试剂配制
    2.2 试验设计
        2.2.1 试验处理
        2.2.2 样品采集及测定指标
            2.2.2.1 样品采集
            2.2.2.2 测定指标
    2.3 测定方法
        2.3.1 血浆指标的测定
            2.3.1.1 血浆生化指标的测定
            2.3.1.2 血浆激素指标的测定
            2.3.1.3 血浆氨基酸的测定
        2.3.2 组织基因检测
            2.3.2.1 RNA提取与纯度鉴定
            2.3.2.2 cDNA的合成
            2.3.2.3 实时荧光相对定量PCR
            2.3.2.4 数据处理
        2.3.3 组织蛋白检测
            2.3.3.1 组织蛋白的提取
            2.3.3.2 组织蛋白浓度的测定
            2.3.3.3 蛋白变性
            2.3.3.4 Western Blotting
            2.3.3.5 灌胶
            2.3.3.6 SDS-PAGE电泳
            2.3.3.7 转膜
            2.3.3.8 剪膜及免疫反应
            2.3.3.9 显影
            2.3.3.10 数据处理
    2.4 数据处理与统计
3 结果与分析
    3.1 普通琼脂糖凝胶电泳检测乳腺组织总RNA的完整性
    3.2 低蛋白日粮添加Met对泌乳小鼠采食量以及仔鼠窝增重的影响
    3.3 低蛋白日粮添加Met对乳腺β-casein基因表达的影响
    3.4 低蛋白日粮添加Met对泌乳小鼠血浆生化指标的影响
    3.5 低蛋白日粮添加Met对泌乳小鼠血浆氨基酸浓度的影响
    3.6 低蛋白日粮添加Met对泌乳小鼠血浆激素水平的影响
    3.7 低蛋白日粮添加Met对乳腺mTOR途径相关信号分子mRNA、总蛋白及磷酸化水平的影响
4 讨论
    4.1 低蛋白日粮添加Met对泌乳小鼠生产性能的影响
    4.2 低蛋白日粮添加Met对泌乳小鼠血浆激素水平的影响
    4.3 低蛋白日粮添加Met对乳腺mTOR信号通路相关基因、蛋白表达的影响
5 结论
参考文献
致谢



本文编号：3848040