应激激素对胸膜肺炎放线杆菌生长调控的研究

发布时间：2024-06-30 08:19

　　胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae, APP)属于巴氏杆菌科,放线杆菌属,能引起猪传染性胸膜肺炎,对世界养猪业造成了严重危害。应激因素是引起APP感染的重要因素之一。近年来有报道表明微生物能够感应并将宿主在应激状态下释放的激素作为一种环境信号,调节自身的致病性和生长等行为,进而影响宿主感染疾病的过程。本实验室前期研究发现儿茶酚胺类激素能广泛调控APP基因的表达,包括重要的毒力、代谢和调控基因,说明APP能主动响应宿主的应激激素。在受到激素影响的差异表达基因中,存在一批APP铁代谢相关基因。本课题以APP为研究对象,研究了在缺铁环境下儿茶酚胺类激素对APP生长的调节作用。进一步通过APP几种基因突变体的生长情况检测以及APP全基因组表达谱芯片,探索了儿茶酚胺类激素影响APP生长的作用机制。1.人工缺铁条件下儿茶酚胺类激素对APP生长的影响在人工培养基(CDM)中添加铁离子螯合剂2,2-联吡啶时,APP生长受到明显抑制,当添加血清时,APP生长也受到抑制,并且添加Mg2+, Ca2+, Fe3+时,只有Fe3+能解除血清的生长抑制。同时发现未结...

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
缩略词(Abbreviation)
1 文献综述
    1.1 猪胸膜肺炎放线杆菌概述
        1.1.1 胸膜肺炎放线杆菌及其危害
        1.1.2 胸膜肺炎放线杆菌毒力因子研究进展
        1.1.3 胸膜肺炎放线杆菌的铁代谢研究进展
    1.2 应激激素对细菌的生长调节
        1.2.1 微生物内分泌学概述
        1.2.2 应激激素调节细菌生长的研究进展
2 目的和意义
3 材料与方法
    3.1 实验材料
        3.1.1 菌株
        3.1.2 培养基配制
        3.1.3 激素配制
        3.1.4 其它试剂配制
    3.2 实验方法
        3.2.1 胸膜肺炎放线杆菌在人工培养基(CDM)中的培养方法
        3.2.2 胸膜肺炎放线杆菌生长的检测
        3.2.3 胸膜肺炎放线杆菌生物被膜形成的检测
        3.2.4 胸膜肺炎放线杆菌表达谱芯片的设计
        3.2.5 细菌总RNA的提取
        3.2.6 芯片杂交与扫描
        3.2.7 芯片数据分析
        3.2.8 荧光定量RT-PCR
4 结果与分析
    4.1 人工缺铁培养条件下应激激素对胸膜肺炎放线杆菌的影响
        4.1.1 胸膜肺炎放线杆菌缺铁培养条件的确定
        4.1.2 激素对胸膜肺炎放线杆菌在添加血清的CDM中生长的影响
        4.1.3 激素对胸膜肺炎放线杆菌在添加转铁蛋白的CDM中生长的影响
        4.1.4 哺乳动物激素受体抑制剂对激素调节胸膜肺炎放线杆菌生长的影响
        4.1.5 激素对胸膜肺炎放线杆菌突变体生长的影响
        4.1.6 激素调节胸膜肺炎放线杆菌生长的浓度范围
        4.1.7 激素对胸膜肺炎放线杆菌生物被膜形成的影响
    4.2 应激激素对胸膜肺炎放线杆菌基因表达的调控
        4.2.1 RNA样品的收集与制备
        4.2.2 表达谱芯片的杂交与数据处理
        4.2.3 对芯片结果的荧光定量RT-PCR验证
        4.2.4 受激素调控的基因概况
        4.2.5 受血清、Epi、NE、DA共同调控的铁代谢相关基因
5 讨论
6 结论
参考文献
致谢
发表论文



本文编号：3998578