胰高血糖素样肽-2对IPEG-J2细胞紧密连接表达与屏障功能的影响及其分子机制研究
发布时间：2023-09-24 16:50
本研究旨在考察胰高血糖素样肽-2(Glucagon-like peptide-2, GLP-2)对脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)应激的仔猪空肠上皮细胞系IPEC-J2细胞紧密连接相关蛋白基因、蛋白表达和屏障功能的影响以及GLP-2调控紧密连接与屏障功能可能的分子机制(PI3K-Akt-mTOR信号转导途径),深入探讨GLP-2影响肠道屏障功能的基本规律以及可能的作用机理。研究共包括两个试验。试验一GLP-2对LPS应激的IPEC-J2细胞紧密连接表达及屏障功能的影响本试验在研究LPS与GLP-2对IPEC-J2细胞紧密连接和屏障功能的影响基础上,进一步考察了GLP-2对LPS应激的IPEC-J2细胞紧密连接和屏障功能的影响。试验一采用单因子设计,分别考察100μg/ml LPS、100nmol/L GLP-2和100μg/ml LPS+100nmol/L GLP-2处理BPEC-J2细胞24h,对细胞形态、紧密连接基因、蛋白表达和屏障功能的影响,每个处理4个重复。通过研究GLP-2对LPS应激IPEC-J2细胞紧密连接和屏障功能相关指标的影响,初步探讨GLP-...
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
本文缩略词表
前言
第一部分 文献综述
1 紧密连接(tight junctions)
1.1 紧密连接的组成
1.2 紧密连接的生物学功能
1.3 PI3K-Akt-mTOR信号转导途径及与紧密连接调节的关系
2 GLP-2的生理功能及其肠营养效应发挥的作用机制
2.1 GLP-2的合成、分泌与代谢
2.2 GLP-2的肠营养效应
2.3 GLP-2发挥生理作用的分子机制研究
3 断奶对仔猪肠道的影响与体外LPS处理断奶仔猪肠细胞应激模型
3.1 断奶对仔猪肠道的影响
3.2 体外LPS处理断奶仔猪肠细胞模型
第二部分 试验研究有待研究的问题及本研究的目的、意义和技术路线
1 有待研究的问题
2 研究的目的和意义
2.1 研究目的
2.2 试验意义
3 技术路线
第三部分 试验研究
试验一 GLP-2对LPS应激的IPEC-J2细胞紧密连接表达及屏障功能的影响
1 材料与方法
1.1 试验材料、主要试剂及仪器
1.2 主要试剂配制
1.3 细胞培养
1.4 试验内容
1.5 数据处理与统计分析
2 试验结果
2.1 GLP-2与LPS对IPEC-J2细胞形态的影响
2.2 GLP-2与LPS对紧密连接蛋白mRNA相对表达量的影响
2.3 GLP-2与LPS对紧密连接蛋白相对表达量的影响
2.4 GLP-2与LPS对IPEC-J2屏障功能的影响
3 讨论
3.1 LPS免疫应激对仔猪肠上皮细胞紧密连接表达和屏障功能的影响
3.2 GLP-2对应激仔猪肠上皮紧密连接蛋白表达和屏障功能的保护效应
4 小结
试验二 2 GLP-2调控IPEC-J2细胞紧密连接表达及屏障功能的分子机制研究
1 材料与方法
1.1 试验材料、主要试剂及仪器
1.2 主要试剂配制
1.3 细胞培养
1.4 试验内容
1.5 数据处理与统计分析
2 试验结果
2.1 GLP-2与抑制剂对Akt、mTOR和紧密连接蛋白mRNA相对表达量的影响
2.2 GLP-2与抑制剂对p-Akt、p-mTOR和紧密连接蛋白相对表达量的影响
2.3 GLP-2与抑制剂对IPEC-J2屏障功能的影响
3 讨论
3.1 PI3K-Akt-mTOR信号转导途径参与上皮细胞紧密连接和通透性调节
3.2 GLP-2通过PI3K-Akt-mTOR信号转导途径调节上皮细胞紧密连接和通透性
4 小结
全文总体讨论
全文结论
有待进一步研究的问题
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的学术论文
本文编号：3848378
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
本文缩略词表
前言
第一部分 文献综述
1 紧密连接(tight junctions)
1.1 紧密连接的组成
1.2 紧密连接的生物学功能
1.3 PI3K-Akt-mTOR信号转导途径及与紧密连接调节的关系
2 GLP-2的生理功能及其肠营养效应发挥的作用机制
2.1 GLP-2的合成、分泌与代谢
2.2 GLP-2的肠营养效应
2.3 GLP-2发挥生理作用的分子机制研究
3 断奶对仔猪肠道的影响与体外LPS处理断奶仔猪肠细胞应激模型
3.1 断奶对仔猪肠道的影响
3.2 体外LPS处理断奶仔猪肠细胞模型
第二部分 试验研究有待研究的问题及本研究的目的、意义和技术路线
1 有待研究的问题
2 研究的目的和意义
2.1 研究目的
2.2 试验意义
3 技术路线
第三部分 试验研究
试验一 GLP-2对LPS应激的IPEC-J2细胞紧密连接表达及屏障功能的影响
1 材料与方法
1.1 试验材料、主要试剂及仪器
1.2 主要试剂配制
1.3 细胞培养
1.4 试验内容
1.5 数据处理与统计分析
2 试验结果
2.1 GLP-2与LPS对IPEC-J2细胞形态的影响
2.2 GLP-2与LPS对紧密连接蛋白mRNA相对表达量的影响
2.3 GLP-2与LPS对紧密连接蛋白相对表达量的影响
2.4 GLP-2与LPS对IPEC-J2屏障功能的影响
3 讨论
3.1 LPS免疫应激对仔猪肠上皮细胞紧密连接表达和屏障功能的影响
3.2 GLP-2对应激仔猪肠上皮紧密连接蛋白表达和屏障功能的保护效应
4 小结
试验二 2 GLP-2调控IPEC-J2细胞紧密连接表达及屏障功能的分子机制研究
1 材料与方法
1.1 试验材料、主要试剂及仪器
1.2 主要试剂配制
1.3 细胞培养
1.4 试验内容
1.5 数据处理与统计分析
2 试验结果
2.1 GLP-2与抑制剂对Akt、mTOR和紧密连接蛋白mRNA相对表达量的影响
2.2 GLP-2与抑制剂对p-Akt、p-mTOR和紧密连接蛋白相对表达量的影响
2.3 GLP-2与抑制剂对IPEC-J2屏障功能的影响
3 讨论
3.1 PI3K-Akt-mTOR信号转导途径参与上皮细胞紧密连接和通透性调节
3.2 GLP-2通过PI3K-Akt-mTOR信号转导途径调节上皮细胞紧密连接和通透性
4 小结
全文总体讨论
全文结论
有待进一步研究的问题
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的学术论文
本文编号：3848378
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