T-2毒素对小鼠胚胎着床和子宫内膜基质细胞的影响

发布时间：2023-10-14 07:37

　　T-2毒素是单端孢霉倍半萜烯族毒素中毒性最强的真菌毒素,主要由镰孢菌属代谢产生,在全世界已被公认为谷物中不可避免的强毒性污染物,能够导致人类和畜禽亚致死性中毒,甚至是致死性中毒。用于饲喂动物的食品加工副产品和制作饲料的谷物原料常被检测出含有高浓度T-2毒素和HT-2毒素。T-2毒素具有显著的生殖毒性,饲料中低剂量的T-2毒素就可以显著影响青年母牛和母羊的卵巢功能,造成一系列的生殖危害,影响畜牧生产进程。T-2毒素对妊娠动物的生殖毒性损伤更为严重,可导致胚胎丢失、流产、胎儿畸形、胎盘和生殖道病理性出血,极大地影响动物的繁殖性能。本试验首先观察对T-2毒素导致的子宫组织学损伤和对胚胎着床的影响,进一步通过荧光定量PCR、Western Bolt等方法检测了T-2毒素对小鼠原代子宫内膜基质细胞凋亡和炎症因子表达的影响。试验主要结果如下:1.使用不同浓度的T-2毒素(0,0.34 mg/kg,1.5 mg/kg,3.0 mg/kg)处理孕4 d小鼠,尾静脉注射台盼蓝检测对胚胎着床的影响。结果显示,T-2毒素能够显著减少胚胎着床数,影响胚胎着床位点的分布,导致子宫两侧胚胎分布不均匀,胚胎间隔距离...

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
文献综述
    第一章 T-2毒素研究进展
        1.1 T-2毒素的生物学特性
        1.2 T-2毒素的污染现状
        1.3 T-2毒素的毒性作用
            1.3.1 T-2毒素的免疫毒性
            1.3.2 T-2毒素的生殖毒性
            1.3.3 T-2毒素的基因毒性和细胞毒性
    第二章 小鼠胚胎着床的研究进展
        2.1 子宫内膜的组织结构
        2.2 胚胎着床和蜕膜化
            2.2.1 胚胎着床
            2.2.2 蜕膜化
        2.3 胚胎着床与子宫局部免疫
            2.3.1 ―有利炎症”—胚胎着床
            2.3.2 ―有害炎症”—炎症反应
            2.3.3 胚胎着床与炎症反应的区别
        2.4 本研究的目的意义及主要内容
试验部分
    第三章 T-2毒素对小鼠早期妊娠的影响
        3.1 材料
            3.1.1 主要材料
            3.1.2 主要设备
            3.1.3 实验动物
        3.2 方法
            3.2.1 T-2毒素的溶解、稀释与保存
            3.2.2 动物处理与分组
            3.2.3 小鼠胚胎着床位点的计数与观察
            3.2.4 统计处理
        3.3 结果
            3.3.1 不同剂量T-2毒素处理后对小鼠胚胎着床的影响
            3.3.2 HE染色
        3.4 讨论
        3.5 小结
    第四章 T-2毒素对小鼠子宫内膜基质细胞的影响
        4.1 材料
            4.1.1 主要试剂
            4.1.2 主要仪器
            4.1.3 实验动物
        4.2 方法
            4.2.1 小鼠原代子宫内膜基质细胞的分离和培养
            4.2.2 小鼠原代子宫内膜基质细胞的纯度鉴定
            4.2.3 小鼠原代子宫内膜基质细胞人工诱导蜕膜化
            4.2.4 T-2毒素对小鼠原代子宫内膜基质细胞活力的影响
            4.2.5 RT-qPCR检测目的基因mRNA表达
            4.2.6 WesternBlot检测目的基因蛋白表达
        4.3 结果
            4.3.1 T-2毒素对小鼠原代子宫内膜基质细胞活力的影响
            4.3.2 RT-qPCR与WesternBlot检测凋亡相关基因的表达
            4.3.3 RT-qPCR检测炎症因子相关的基因表达
            4.3.4 WesternBlot检测炎症信号通路相关基因的表达
            4.3.5 RT-qPCR检测人工诱导蜕膜化标志基因的表达
            4.3.6 RT-qPCR检测人工蜕膜化后炎症因子的基因表达
            4.3.7 RT-qPCR检测炎症信号通路下游的蜕膜化功能基因的表达
        4.4 讨论
        4.5 小结
结论
参考文献
缩略词
致谢
作者简介



本文编号：3853881