三氯化铝抑制大鼠成骨细胞功能的BMP/Smad信号转导机制

发布时间：2024-01-30 11:38

　　以体外培养SD大鼠乳鼠颅骨成骨细胞(OB)为研究对象,传代培养至第3代,经鉴定后,在培养体系中分别添加终浓度为0 mg/m L(对照组)、0.063 mg/m L(低剂量组)、0.126mg/mL(中剂量组)、0.252 mg/mL(高剂量组)三氯化铝(Al Cl3·6H2O),染铝24 h。采用实时荧光定量PCR检测OB内BMP-2、BMPR-ⅠA、BMPR-Ⅱ、Runx2、Osterix、COL-I、ALP和BGP m RNA表达水平,Western blot检测OB细胞内BMP-2和p-Smad1/5/8、细胞膜上p BMPR-ⅠA及细胞核内Runx2和Osterix蛋白表达水平,免疫共沉淀方法检测OB细胞质及细胞核内Smad1/5/8/4复合物蛋白表达水平。旨在研究铝抑制OB功能的BMP/Smad信号转导机制,结果表明:(1)染铝组OB细胞内BMP-2 m RNA及蛋白表达水平和p-Smad1/5/8蛋白表达水平、BMPR-A和BMPR-m RNA表达水平、细胞膜上p BMPR-A蛋白表达水平及细胞质和细胞核内Smad1/5/8/4复合物蛋白表达水平显著低于CG(p<0....

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【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 铝对成骨细胞功能的影响
    1.2 BMP/Smad信号转导通路与成骨细胞
    1.3 细胞核转录因子与成骨细胞
        1.3.1 Runx2与OB
        1.3.2 Osterix与OB
    1.4 研究目的与意义
2 材料与方法
    2.1 实验主要仪器与试剂
        2.1.1 实验主要仪器
        2.1.2 主要试剂
    2.2 大鼠颅骨OB的培养及处理
        2.2.1 颅骨OB提取
        2.2.2 OB传代培养及处理
        2.2.3 样品采集
    2.3 检测项目与方法
        2.3.1 OB内BMP-2、BMPR、Runx-2、Osterix、Col、ALP、BGP检测
        2.3.3 OB 内蛋白表达的检测
    2.4 实验数据的分析及统计
3 实验结果
    3.1 AlCl₃对 OB 质 BMP-2、BMPR-ⅠA、BMPR-Ⅱm RNA 的影响
    3.2 AlCl₃对OB质内Runx-2、Osterix m RNA表达的影响
    3.3 AlCl₃对OB细胞内Col、ALP和BGP m RNA表达的影响
    3.4 AlCl₃对OB细胞内BMP-2 蛋白表达的影响
    3.5 AlCl₃对OB细胞膜p BMPR-A蛋白表达的影响
    3.6 AlCl₃对OB细胞内p-Smad1/5/8 的影响
    3.7 AlCl₃对OB细胞质及细胞核内Smad1/5/8/4 复合物的影响
    3.8 AlCl₃对OB细胞核内Runx2和Osterix蛋白表达的影响
4 讨论
    4.1 AlCl₃对OB中BMP/Smad信号通路的影响
        4.1.1 AlCl₃对OB中BMP-2 影响
        4.1.2 AlCl₃对OB中BMPR型的影响
        4.1.3 AlCl₃对OB内p-Smad1/5/8 和OB细胞质及细胞核中Smad1/5/8/4 的影响
    4.2 AlCl₃对 OB 细胞核转录因子 Runx-2 和 Osterix 的影响
    4.3 AlCl₃对OB中COL、ALP、BGP mRNA的影响
5 结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文



本文编号：3890082