口蹄疫病毒铁蛋白纳米颗粒抗原的表达与鉴定

发布时间：2024-02-03 01:03

　　口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的主要针对偶蹄目动物的急性、热性、接触性动物传染病。严重影响了畜牧业发展和国际畜类商品的贸易。口蹄疫病毒是一种感染性强,传播方式多样、可持续性感染且易于突变的病毒,给防治和消灭该病毒带来了很大的难度。本研究主要利用铁蛋白纳米粒子可修饰自组装的特性,通过家蚕杆状病毒表达系统作为疫苗开发和抗原递呈的新平台,将口蹄疫病毒O型的VP1蛋白递呈到铁蛋白壳外表面,诱导出较强的免疫反应,为获得具有广谱、安全、高效的口蹄疫纳米颗粒基因工程疫苗奠定基础。本文选取最具代表性的10条FMDV毒株的VP1氨基酸序列,通过序列分析,从中选用KY399466.1的VP1氨基酸序列。铁蛋白亚基选用幽门螺旋杆菌铁蛋白(NP₂23316)5-167位氨基酸序列,对铁蛋白基因进行点突变(N19Q)消除糖基化位点,并在铁蛋白的氨基酸序列N末端加入SGG linker,用于将铁蛋白的N末端与VP1的C末端连接到一起。对这两种序列进行家蚕密码子优化和合成。将口蹄疫病毒vp1基因序列与ferritin基因序列通过融合PCR重组成vp1-ferritin基因序列,该融合基因序列与口蹄疫...

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1铁蛋白结构示意图（DOMINGUEZ-VERAetal.,2010）

髀?4基不具有亚铁氧化酶活性中心，但其与铁蛋白的成核、矿化作用以及铁的长期储存有关系（HARRISONetal.,1996）。在同一种生物的不同组织器官中，H亚基和L亚基的占比是完全不同的。在最初的研究中发现，H亚基在心脏中的占比最高；但是在肝脏中主要存在的亚基是L亚基。因此，有....

图2-1VP1与Ferritin的PCR扩增结果

中国农业科学院硕士学位论文第二章VP1-Ferritin的原核表达23ab图2-1VP1与Ferritin的PCR扩增结果（a）M：DNA分子量标准；1、2：VP1的PCR扩增产物；（b）M：DNA分子量标准；1、2：FerritinPCR扩增产物Fig2-1PCRamplifi....

图2-2VP1-Ferritin的PCR扩增M：DNA分子量标准；1、2：VP1-Ferritin融合PCR扩增产物

中国农业科学院硕士学位论文第二章VP1-Ferritin的原核表达23ab图2-1VP1与Ferritin的PCR扩增结果（a）M：DNA分子量标准；1、2：VP1的PCR扩增产物；（b）M：DNA分子量标准；1、2：FerritinPCR扩增产物Fig2-1PCRamplifi....

图2-3pUC-57-VP1的酶切结果

中国农业科学院硕士学位论文第二章VP1-Ferritin的原核表达24图2-3pUC-57-VP1的酶切结果M：DNA分子量标准；1：BamHI和EcoRI双酶切的VP1Fig.2-3DigestionresultsofpUC-57-VP1M:DNAmolecularmarker....

本文编号：3893442