晋岚绒山羊羔羊超排方法及卵母细胞体外成熟培养体系的建立

发布时间：2024-02-15 17:37

　　本试验以4-20周龄晋岚绒山羊母羔为研究对象,应用超数排卵技术、细胞培养技术、Real time PCR技术,确定了晋岚绒山羊幼羔超排方法及体外成熟培养液体系,探讨了卵母细胞成熟前后,卵泡发育相关的基因和受体基因的表达差异。旨在为晋岚绒山羊胚胎生产提供更多优质的卵母细胞,更好地保护其优秀的种质资源,为其遗传育种过程奠定一定的理论基础。主要试验结果如下： (1)初步筛选出晋岚绒山羊羔羊超数排卵方法：6-10周龄是晋岚绒山羊羔羊的适宜超排周龄;国产激素与进口激素差异不显著(P>0.05);超排方案是FSH+PMSG法,连续两天上午8：00和下午5：00注射4mg FSH,最后一次注射FSH时注射400IUPMSG;活体采卵对羔羊成年后繁殖性能无显著影响。 (2)初步确定了晋岚绒山羊母羔卵母细胞体外成熟培养液体系：培养液中添加100μg/ml谷氨酰胺能显著提高卵母细胞成熟率(P<0.05)；加入100μg/ml谷氨酰胺后,再添加50μg/ml或100μg/ml IGF-I,可以显著提高卵母细胞的成熟率(P<0.05)。 (3) Real time PCR检测到用筛选出的方法...

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【部分图文】：

图2-1羔羊超排后卵翼(A)

#、羊超排后印巢及印母细胞观察黑羊超排后卵巢如下图2-1A所示，两侧卵巢上均清晰可见排出的多个卵泡，说明试验效果良好，可用于后续试验的进行。吸取卵巢卵泡液在显微镜下观察卵母细胞如图2-1B所示，由图可见收集到的卵母细胞形态正常，胞质均匀，卵丘细胞清晰可见。观察完后对可用卵母细....

图2-2周龄对超排后卵母细胞数量的影响

按周龄将盖羊分组进行超排，釆用同种激素和同一超排方法，盖羊所釆集的卵母细胞结果见下图（图2-2)。从图中可以看出，超排盖羊的周龄对超排后收获的卵母细胞数量有」定影响。6-10周龄母盖收获的卵母细胞数高于4-5周龄，差^显著-14-

图3-1卵母细胞组图

jig/ml、50ng/mK100ng/ml和150jxg/rnl四个不同浓度的谷氣酰胺体外成熟培养液中进行成熟培养。图3-1为卵母细胞组图：图A为未成熟卵母细胞，图B为排出第一极体的卵母细胞，图C为培养后非正常卵母细胞，卵母细胞内部空泡化，图D为收集到的裸卵。5 0-2....

图4-1实时荧光定量PCR扩增条件与溶解曲线条件Fig.4-1ThermalprofileofamplificationanddissociationforRealtimePCR

1Cycle图4-1实时劳光定量PCR扩増条件与溶解曲线条件Fig.4-1ThermalprofileofamplificationanddissociationforRealtimePCR-29-

本文编号：3900080