陕西某猪场猪德尔塔冠状病毒N基因的序列分析与原核表达

发布时间：2024-02-19 16:32

　　为克隆猪德尔塔冠状病毒N基因并进行序列分析及原核表达,参考GenBank上登录的PDCoV(HKU15-44)N基因序列,合成1对(PDCoV)游引物,PCR扩增N基因,并进行序列分析和原核表达。结果表明,成功克隆了1 026 bp的N基因,核苷酸序列分析表明,PDCoV N基因与国内分离株核苷酸同源性最高为98.76%,氨基酸分析表明N蛋白不含信号肽和跨膜区。经IPTG诱导后成功表达了分子质量约47 ku的N蛋白,该蛋白能与PDCoV阳性血清结合,具备良好的抗原性。研究结果为进一步建立PDCoV快速检测方法和研究PDCoV亚单位疫苗奠定了基础。

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

图1PDCoV陕西株N基因PCR扩增

Westernblot结果分析,N蛋白能与PDCov阳性血清特异性结合,而阴性对照空载体没有出现特异性条带(图6)。图2重组质粒pET-28a-N的双酶切鉴定

图2重组质粒pET-28a-N的双酶切鉴定

图1PDCoV陕西株N基因PCR扩增图3N蛋白的生物信息学分析

图3N蛋白的生物信息学分析

图2重组质粒pET-28a-N的双酶切鉴定图4N核苷酸序列系统进化树

图4N核苷酸序列系统进化树

图3N蛋白的生物信息学分析图5N重组蛋白的SDSPAGE分析

本文编号：3902997