水牛颗粒细胞凋亡相关基因和miRNA表达及雌二醇对其表达调控的研究

发布时间：2024-02-24 11:43

　　哺乳动物卵泡在发育过程中,除少量发育成熟并排卵外,绝大部分发生退化、闭锁。研究表明,卵泡闭锁的主要诱因是颗粒细胞凋亡。目前已有人、鼠、牛、猪、绵羊和山羊等动物的颗粒细胞凋亡及其调控机理的研究报道,但对水牛卵泡颗粒细胞凋亡及卵泡闭锁的分子机制研究较少。为此,本试验首先对不同闭锁程度水牛卵泡颗粒细胞凋亡相关基因及miRNA的表达规律进行了分析,以了解颗粒细胞凋亡与卵泡闭锁的关系,初步阐明水牛卵泡闭锁的分子机制。其次,通过研究雌二醇(E2)对体外培养的水牛颗粒细胞凋亡、细胞周期、凋亡相关基因和miRNA表达的影响,探索E2在调控水牛颗粒细胞凋亡过程中的作用,为优化颗粒细胞体外培养条件以及进一步了解水牛卵泡闭锁机理奠定基础。 一、不同闭锁程度水牛卵泡颗粒细胞凋亡相关基因和miRNA的表达。 1.采用HE染色、DNA ladder分析和Tunel法检测了HF、EF和PF三种不同闭锁程度水牛卵泡颗粒细胞的凋亡状态。结果发现,HF卵泡腔中无脱落的颗粒细胞,其中的颗粒细胞基因组DNA没有出现明显的DNAladder,细胞凋亡率为9.32%。EF卵泡内壁结构较松散,卵泡腔中可见到有少量脱落的颗粒细胞,其...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1哺乳动物卵泡发育一般模式

这一过程目前被认为是卵泡发育的基本过程，并被广泛认可[2]。哺乳动物卵泡发育一般过程如图1所示。Primary 一 Pr??ntr麟丨lotllcia follicleP—^ Early.?,ra.follicle —T_\、 Granulosa 'follicle^ ....

图2雌激素调控细胞调亡模式图[82]

图2雌激素调控细胞调亡模式图[82]Fig.2ThetwomainpathwaysinvolvedinapoptosisofEstrogenregulation其他激素如生长激素（growthhormone,GH)，抑制素（inhibin)和活化素（ac....

图1-1不同闭锁程度水牛卵泡HE染色结果

泡（EF)和晚期闭锁卵泡（PF)三组。对各组卵泡进行石蜡切片、HE染色，对其形态学特征进行描述（图1-1)(表1-13)。'初步判断对卵泡进行的分类基本正确，可用于后’续试验。29

图1-2不同闭锁程度水牛卵泡颗粒细胞DNA电泳结果

明显的梯状条带。EF和PF样品基因组抹带较浓，有大量的DNA降解成180-200bp大小的片段，出现明显的梯状条带，即DNA“ladder”（图1-2)。基因组DNA电泳结果进一步说明对卵泡进行的分类判断正确。30

本文编号：3908944