抗鸭瘟病毒活性物质的筛选及白藜芦醇抗鸭瘟病毒活性与作用机制研究

发布时间：2024-02-29 06:17

　　疱疹病毒临床治疗药物以核苷酸类似物为主。该类药物作用靶点类似,容易导致交叉耐药性,目前临床已有耐药毒株出现。因此,发现新的靶点药物是未来研究疱疹病毒药物的重点。鸭瘟病毒(Duck Plague Virus, DPV)是一种急性传染性病毒,该病毒属疱疹病毒科。目前,没有针对DPV的治疗药物出现,生产上以注射疫苗预防为主。本研究拟从天然药用产物中筛选出具有抗DPV活性的物质,并对该物质抗病毒机制进行研究,希望能找到新的作用靶点,为鸭瘟的治疗提供新的方法,也为抗疱疹类病毒药物的开发提供新的靶点和思路。本研究分为以下几个部分：1体外抗DPV活性物质筛选选取多种天然药用产物,运用细胞病变法和噻唑蓝比色法相结合的方法,进行体外抗DPV研究。结果如下：①传统中药粗提物中,虎杖和茜草的醇提物具有一定的抗DPV活性：虎杖醇提物对DPV最高抑制率为76.5%；茜草醇提物对DPV最高抑制率为48.91%。②印楝种仁醇提物石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和水层分对DPV的最高抑制率分别为13.23%、29.24%和11.72%。③油樟挥发油及其主要活性成分中,松油烯-4-醇、α[-松油烯、γ-松油烯和1,8-桉叶...

【文章页数】：164 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图６－１?ＤＰＶ－ＣＨｖ?ＵＬ３０基因ＰＣＲ产物鉴定图??１：?ＤＰＶ－?ＣＨｖ?ＵＬ３０ＰＣ民产物；Ｍ：ＤＬ１０００?Ｍａｒｋｅｒ??

（１〇１０￣１〇２）作为标准阳性模板，进行扩增。系统自动分析软件显示Ｃｔ值与标准??阳性模板浓度的对数之间存在良好的线性关系（民２＝０．９９７），ＰＣＲ扩增效率为??９９．７％，标准曲线如图６－２所示。标准曲线方程：Ｃ户－３．３２８ｘ］ｇ?［ｖｉｍｓ??ｃｏｐｉｅｓ／５．２５］＋....

图６－４白黎芦醇对ＤＰＶ在ＤＥＦｓ中的生长曲钱的影晌ｉ??Ｆｉｇ．?６－４?Ｔｈｅ?Ｓｎｆｌｅｎｃｅ?ｏｆ?ｒｅｓｖｅｎｉｔｒｏｌ?ｏｎ?ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅｓ?ｏｆ?ＤＦＶ?扣?ＤＥＦｓ．??５７??

?４０??Ｃｙｃｌｅｓ??图６－３?ＦＱ－ＰＣＲ检测白藝芦醇作用下不同时间点ＤＥＦｓ中ＤＰＶ基因组样品的扩增曲线??Ｆｉｇ．?６－３?ＡｍｐＨ巧ｃａｔｉｏｎ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ＤＰＶ?ｇｅｎｅ?ｓａｍｐｌｅｓ?ｅｘｔｒａｃｔｅｄ?ｆｒｏｍ?ＤＥＦｓ?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅ打ｔ?ｐｏ....

图７－１不同给药时间作用后ＤＥＦｓ中生长的ＤＰＶ滿度的影响??不同的大写字母表示用药组与病毒感染组的显著性差异（Ｐ＜０．０１）；不同的小写字母表示各??用药组之间的显著性差异（ｐＯ．Ｏｌ）

ＴＣＩＤｓｏ的负对数明显增高，为６．２５±０．１７。??根据表７－３所得数据，做图并通过ＳＰＳＳ软件对各组差异性进行统计学分析，??结果如图７－１所示。分析表明，各用药组与病毒感染组结果差异显著（ｐＯ．Ｏｌ），??说明在所设置的各加药时间点加入白黎芦醇溶液能够明显地抑制ＤＰＶ在Ｄ....

图８－１总民ＮＡ电泳图??Ｆｉｇ－８－ｌ?Ｅｌｅｃ：ｔＴ〇ｐｈＧｒｅｔ：ｏｇｒａｍ?ｏｆＲＮＡｓａｍｐｉｅｓ??

３实验结果??３．１ＲＮＡ完整性及纯度分析??２％琼脂糖凝胶电泳检测不同时间点提取的总ＲＮＡ纯度，电泳结果如图８－１??所示，２８Ｓ、１化和５ＳＨ条电泳条带清晰可见，其结果表明，提取总ＲＮＡ完整??性良好；通过核酸蛋白检测仪检测ＲＮＡ样品０说６０／ＯＤ２８０，其值在１．８０－１．....

本文编号：3914624