猪体细胞核移植重编程和胚胎发育影响因素研究

发布时间：2024-03-12 00:52

　　体细胞核移植（somatic cell nuclear transfer，SCNT）可以快速大量复制具有优良数量、质量性状家畜个体，是一项有着广泛应用前景重要胚胎工程技术。本实验以提高猪SCNT效率为中心，从三个方面对猪SCNT重编程、胚胎发育影响因素及其分子细胞机制进行研究：（1）分析猪SCNT影响因素；（2）优化猪SCNT胚胎培养体系并研究胚胎发育相关机制；（3）制备嵌合体猪。 对作者所在课题组2008年至2012年猪胚胎移植数据统计分析发现：春季进行胚胎移植成功率远高于冬季（33.6%vs.18.6%，p=0.006）；胚胎移植时未排卵代孕母猪怀孕成功率高于已排卵受体母猪（32.0%vs.17.5%，p=0.004）；流产主要集中出现在胚胎移植后第27天到34天之间；根据生存分析结果，可以推测正常受精母猪和代孕母猪分别在117天和125天前产仔完毕；代孕母猪怀孕周期与产仔数呈负相关关系。 为了提高克隆效率，使用维生素C、丙戊酸钠（valproic acid，VPA）和Scriptaid对猪SCNT胚胎进行处理，并对相应分子细胞机制进行探索。50μg/ml维生素C处理猪SCNT胚胎...

【文章页数】：123 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1.1不同月份怀孕情况

。然而，同一时间在世界不同地区的气候存在很大差异。因而，在研究中，依据候温法进行季节推定（表1.1）。如表1.5所示，春季、季和冬季PR率并不存在显著差异，而春季中FTP率显著高于夏季冬季。这些结果说明春季和秋季均为进行SCNT的合适季节。另一实验室报道了相似的....

图1.2线性回归和生存分析

FTP数目和总体受体母猪数目之间关系密切（p=0.001）。如图1.2A所示，FTP数目（y）和总受体母猪数目（x）可以用线性回归方程表示：y=0.386x-7.387。该线性回归方程不仅说明我们的SCNT系统稳定，而且暗示随着胚胎移植次数增多将有获得更多怀孕到期受体....

图2.1胎儿成纤维细胞和囊胚中的acH4K5免疫染色Figure2.1Acetylationlevelsofhistone4lysine5infetalfibroblast

成纤维细胞在含有维生素C培养液中培养15小时并不影响其H4K5乙酰化水平（图2.1）。用维生素C对SCNT胚胎在激活后进行15小时处理，分别在原核/假原核时期、二细胞、四细胞和囊胚阶段检测胚胎acH4K5乙酰化水平。结果显示，维生素C处理对原核/假....

图2.2经过VPA处理或者未处理的SCNT胚胎和胎儿成纤维细胞相对乙酰化水平

图2.2经过VPA处理或者未处理的SCNT胚胎和胎儿成纤维细胞相对乙酰化水平Figure2.2RelativelevelofacH3K14andacH4K5infetalfibroblastcellsorSCNTembryoswithout....

本文编号：3926286