抗乙型脑炎病毒E蛋白多克隆抗体的制备及宠物犬感染乙脑病毒血清中和抗体的动态变化研究

发布时间：2024-03-23 16:01

　　日本脑炎(JE)是一种广泛流行于亚洲和环太平洋地区的人兽共患传染病，它影响着人类的健康并危害着畜牧业，特别是养猪业的发展。其病原体日本脑炎病毒(JEV)是一种典型的虫媒病毒，蚊子在该病毒的传播过程中发挥着重要的作用。现已报道自然界中有60多种动物可感染JEV，其中多数物种感染病毒后没有明显的临床症状，只能检测到动物血清高水平的中和抗体。 1.JEV EDIII结构域蛋白的原核表达、多克隆抗体的制备与鉴定 JEV表面的囊膜蛋白(E蛋白)是该病毒的主要结构蛋白之一，该蛋白主要由3个结构域组成，其中结构域III(E蛋白第312～411位氨基酸残基)独立地在病毒表面折叠成为免疫球蛋白样结构，为诱导产生中和抗体的重要区域。实验中采用原核表达系统融合表达pET-32a-EIII蛋白，经过Ni+柱纯化后多次免疫新西兰大白兔，制备兔抗JEV E蛋白多克隆抗体。间接ELISA结果表明，以原核表达的重组蛋白为抗原，检测该多克隆抗体血清的效价为1:256000；Western-blot试验中，1:1000倍稀释的多抗血清与1μg的重组蛋白反应，能够显示出明显的条带，与经过浓缩的JEV全病毒抗原反应显出一条分...

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【部分图文】：

图1世界范围内JE的流行分布图（引自CDC网站）

图1世界范围内JE的流行分布图（引自CDC网站）Fig.1EpidemicdistributionofJapaneseencephalitisintheworld(fromCDCwebsite).1.2人感染JEV及治疗感染JEV而发....

图2中国每年JE发病与死亡人数分布（2001-2012）

图2中国每年JE发病与死亡人数分布（2001-2012）Fig.2TheincidenceanddeathdateofJapaneseencephalitisin2001-2012,China1.1.3JE对畜牧业的影响JE的流行给畜牧业特....

图3JEV的基因组结构示意图

抗乙型脑炎病毒E蛋白多克隆抗体的制备及宠物犬感染乙脑病毒血清中和抗体的流行病学调查降系数约为40-45S，在氯化铯中的浮密度约为1.24g/mL。JEV完整的基因组包括一个开放阅读框（openreadingframe,ORF)和5'和3'端的非编码区（noncoding....

图4JEV的复制Fig.4Japaneseencephalitisvirusreplication

山东农业大学硕士专业论文是与母链完全互补的新RNA链（即负链）(UchilandSatchidanandam,2003)。JEV的这种复制形式是不对称的和半保留的，最终正链的量是负链的10-100倍。而所谓的黄病毒科病毒基因组的环化是通过5'和3'端非编码区保守....

本文编号：3936151