金葡菌奶牛乳房炎抗性相关miRNA的筛选及其靶基因调控机制研究

发布时间：2024-03-24 22:58

　　金黄色葡萄球菌(以下简称,金葡菌)奶牛乳房炎是奶牛乳腺组织受到金葡菌感染而引起的炎症反应。长期的抗生素治疗不仅加剧了致病菌的抗药性,同时增大了药物残留所带来的隐患。培育抗金葡菌奶牛乳房炎新品系成为了解决这一问题的期望手段。MicroRNAs(以下简称miRNAs)可通过遏制其靶基因的翻译或导致靶基因降解而发挥调控功能。因此,本研究旨在挖掘金葡菌乳房炎抗性相关miRNAs,并对其靶基因参与金葡菌奶牛乳房炎发生的调控机制进行研究,以期为金葡菌奶牛乳房炎的早期诊断及抗性分子标记辅助选择的鉴定奠定基础,为揭示乳腺组织炎症反应发生的抗性机制研究提供依据。本研究首先通过体细胞计数、病原菌鉴定、奶样PCR以及组织切片观察等方法鉴定健康牛及金葡菌乳房炎患病牛,并利用高通量测序技术构建乳腺组织miRNAs差异表达谱。经生物信息学分析,对差异表达miRNAs进行靶基因预测及功能注释分析,获得金葡菌乳房炎抗性相关miRNAs,并利用RT-qPCR对其进行鉴定。进而,利用生物信息学技术预测金葡菌乳房炎抗性相关miRNA的候选靶基因,并利用细胞培养、miRNA转染、RT-qPCR、Western Blot、种子...

【文章页数】：102 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图3-1奶牛乳房炎病原菌分离鉴定结果

363.1.2奶牛乳汁分离病原菌的鉴定对1号、4号、8号牛，以及2号、6号、7号奶牛的乳汁进行病原菌分离培养发现，在1号、4号和8号等三头健康牛的乳汁中，并未分离获得金葡菌及其他乳房炎致病菌；而在2号、6号和7号等三头乳房炎奶牛中，分离获得了大肠杆菌，链球菌和金葡菌等常见乳房炎致....

图3-2金葡菌nuc基因奶样PCR鉴定结果

结果与分析37图3-2金葡菌nuc基因奶样PCR鉴定结果Fig.3-2PCRidentificationresultsofmilksampleofS.aureusnucgene注：1-3：健康牛4-6：金葡菌乳房炎候选牛Note:1-3:Healthycows4-6:S.aure....

图3-3奶牛乳腺组织切片观察结果

结果与分析37图3-2金葡菌nuc基因奶样PCR鉴定结果Fig.3-2PCRidentificationresultsofmilksampleofS.aureusnucgene注：1-3：健康牛4-6：金葡菌乳房炎候选牛Note:1-3:Healthycows4-6:S.aure....

图3-4六个文库中小RNA的长度分布

结果与分析39表3-3sRNA类型注释统计Table3-3sRNAtypeannotationstatisticsTypesS01S02S03S04S05S06Number(%)Number(%)Number(%)Number(%)Number(%)Number(%)scRNA0....

本文编号：3938150