microRNA-663对羊驼黑色素细胞黑色素合成的影响

发布时间：2024-03-29 20:46

　　毛色是毛用动物重要的经济性状,哺乳动物毛色都是由黑色素细胞产生黑色素形成的,黑色素种类和相对数量决定了动物被毛有由深到浅多种颜色。黑色素的生成与毛囊的生长周期有着密切的联系。毛囊生长周期分为：生长期、退行期和静止期。TGF-β1基因通过抑制细胞增殖和促进细胞凋亡控制毛囊向退行期转变。成熟的microRNAs (miRNAs)是21-24个核苷酸长度的非编码RNA,在转录后水平负调控靶基因的表达。本实验室前期筛选出miR-663在不同毛色羊驼皮肤组织中具有差异表达。本研究的目的是鉴定miR-663的靶基因和研究miR-663在黑色素合成过程中的作用。研究内容：(1)利用生物信息学软件预测和筛选miR-663的靶基因。(2)靶基因TGF-β1的基因克隆表达及定位分析。(3)双荧光素酶报告基因检测系统验证miR-663的靶基因。(4)利用瞬时转染miR-663模拟物(miR-663mimic和]miR-663inhibitor)在羊驼黑色素细胞中过表达和减低表达miR-663;利用qRT-PCR和Western blot检测细胞转染后TGF-β1Smad3、Smad4、Smad7和黑色素合成...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-3miRNAs的生物合成过程

图1-3miRNAs的生物合成过程Fig.1-3TheBiogenesisofmiRNAs3.2miRNA的功能3.2.1miIlNA作用机制miRNA通过与祀mRNA的3’UTR不完全互补配对，抑制IEmRNA翻译或引起祀mRNA的降解。在植物中，多数miRNA可....

图1-4TGF-p信号通路Fig.1-4TGF-Psignalingpathways

引起TGF-pRI、R-Smad和Smad4的降解，负调控TGF-P信号转导【78]。4.2.2非依赖Smad蛋白的TGF-P信号转导TGF-P活化蛋白激酶是研究较多的TGF-P信号转导途径，细胞外信号调节激酶(Erk)X-Jun氨基端激酶和p38促分裂原活化蛋白激酶途径丨79....

图3-2-6TGF-pl基因在山羊不同组织中的表达分析

2.2.2TGF-pl基因在山羊不同组织中的表达根据NCBI上公布的山羊TGF-pi基因序列设计合成用于定量检测TGF-pi基因特异性引物，用Trizol法提取山羊不同组织中的总RNA，合成cDNA。利用qRT-PC技术对TGF-pl基因在山羊的皮肤、肾、肝、大脑、睾丸和淋巴中....

图3-3-2293T细胞中miR-663mimic和miR-663inhibitor对劳光素酶表达活性的影响

miR-663inhibitor图3-3-2293T细胞中miR-663mimic和miR-663inhibitor对劳光素酶表达活性的影响Fig.3-3-2Luciferaseactivityof293TcelltransfectionmiR-663mi....

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