河南PCV2分离鉴定及筛选毒株对小鼠免疫原性研究

发布时间：2024-03-30 09:52

　　PCV2属于圆环病毒科,无囊膜,单股环状DNA病毒。基因组全场1 766-1 768 bp。含有两个重要的开放阅读框:ORF1编码病毒复制蛋白(Rep、Rep’),全长945 bp;ORF2编码含有免疫原性的病毒结构蛋白(Cap),全长702或705 bp。PCV2在世界范围内普遍流行,引起猪圆环病毒相关疾病(Porcine circovirus associate disease,PCVAD),例如仔猪断奶衰竭综合征、皮炎肾病综合征和繁殖障碍等。PCV2感染已经给全世界养猪业带来了巨大的损失,接种疫苗仍旧是预防PCV2感染的最有效途径。为了得到PCV2优良毒株,对河南省部分地区疑似PCV2感染的猪淋巴结、脾脏和肺脏组织进行PCR检测,将PCR阳性毒株接种在无PCV污染的PK-15细胞上并利用IPMA进一步确认。将检测结果为阳性的PCV2全基因组进行克隆、测序,成功分离出13株PCV2。13个PCV2分离株全基因组长度为1 767-1 768 bp,毒株之间全基因组同源性为94.7%-99.9%,ORF2基因同源性为89.7%-100%,与国内外分离株同源较高,基因组变异程度不大。其中...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－丨组织病料中ＰＣＶ２的ＰＣＲ扩增结果??

经ＤＮＡ提取，ＰＣＲ扩增后，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测表明，来自河南省不同地??区的疑似ＰＭＷＳ患猪的２３份病料组织中，有１３份可以扩出目的片段为５００?ｂｐ的ＰＣＶ２特??异性核苷酸条带（图１－１），ＰＣＶ２检出率为５６．５％。??２０００务魏解？魏「，、」??ｌｏｏｏ?ｖ．....

图１－３细胞毒中ＰＣＶ２的ＰＣＲ扩增结果??

Ａ?Ｂ??图１－２丨ＰＭＡ检测感染ＰＣＶ２的ＰＫ１５细胞??Ｆｉｇ．?１－２?ＩＰＭＡ?ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ?ＰＫ１５?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ＰＣＶ２??Ａ：感染ＰＣＶ２的ＰＫ１５细胞；Ｂ：未感染的ＰＫ１５细胞对照??Ａ：?ＰＫ１５?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ＰＣＶ２；....

图１－２丨ＰＭＡ检测感染ＰＣＶ２的ＰＫ１５细胞??

■■■??ｉ〇〇??图１－３细胞毒中ＰＣＶ２的ＰＣＲ扩增结果??Ｆｉｇ．?１－３?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｒｅｓｕｌｔ?ｏｆ?ＰＣＶ２?ｉｎ?ｔｈｅ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ＰＫ－１５?ｃｅｌｌｓ??Ｍ．?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ?ＤＬ２０００；?】－】３．细胞培养物中ＰＣＶ２....

图１－６?ＰＣＶ２?ＯＲＦ２序列分析??Ｆｉｇ．?１－６?Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ??

针对ＯＲＦ２基因及Ｃａｐ蛋白进行分析，可以发现分离株ＸＹ、ＰＤＳ－ｌ和ＸＺ的ＯＲＦ２长??度为７０２?ｂｐ，编码２３３个氨基酸，剩余１０支分离株的ＯＲＦ２长度均为７０５?ｂｐ，编码２３４个??氨基酸。ＯＲＦ２基因同源性为８９．７％－１００％?（图１－６），差异相比全基因组同源性要....

本文编号：3942180