一种高稳定性、高捕获率免疫胶体金的构建

发布时间：2024-03-31 17:08

　　为构建一种核酸免疫胶体金的制备方法,将抗体与寡核苷酸共价连接,并与含互补序列的寡核苷酸修饰的胶体金杂交。紫外扫描检测显示,使用4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐(SMCC)共价偶联修饰的抗体-核酸,抗体分子修饰核酸的数量最多。通过蛋白定量、琼脂糖凝胶电泳、盐沉、pH调节等试验,比较核酸免疫胶体金和传统静电吸附方式制备的免疫胶体金的抗体结合率、目标捕获率以及探针的稳定性,并初步测试了新型探针在试纸条检测上的应用。结果表明:构建的核酸免疫胶体金的抗体结合率比传统免疫胶体金高20%,探针捕获目标的效率高40%(以蓝耳病毒为例),稳定性更好(0.5～1 mol·L^-1盐浓度及pH 4～10),试纸条检测有明显特异性(以蓝耳病毒为例)。这一研究成功构建了一种具有更好抗体负载率、靶病毒结合率、稳定性的核酸免疫胶体金,有望替代传统的免疫胶体金,制备更稳定更灵敏的试纸条,用于抗原、抗体及病毒的快速检测。

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1材料与方法
    1.1试剂和仪器
    1.2抗体修饰
        1.2.1点击化学方式
        1.2.2 SMCC偶联方式
    1.3核酸免疫胶体金制备
    1.4表征与测试
2结果与分析
    2.1核酸免疫胶体金的抗体修饰表征
    2.2免疫胶体金的抗原结合活性
    2.3免疫胶体金的抗体及靶病毒结合能力
    2.4免疫胶体金的盐和pH稳定性
    2.5核酸免疫胶体金用于试纸条的初步测试
3讨论
4结论



本文编号：3944247