蒙脱石承载枯草芽孢杆菌及其抑菌、屏障功能的研究

发布时间：2024-07-06 08:18

　　基于益生菌的微生态制剂,具有无毒、无害、无残留的特点,是近年来发展最快的新型绿色饲料添加剂。枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis, B.subtilis)具有抗逆性,虽可100%直达动物肠道,但与肠道细菌的竞争力不强,较难定植。本研究以纳米蒙脱石(MMT)为在载体,制备了蒙脱石-枯草芽孢杆菌(MMT-B.subtilis)复合物,以提高B.subtilis的肠道定植能力。主要试验结果如下： (1) MMT-B.subtiis复合物的制备、表征与制备条件的优化：分别采用激光粒度电位、X射线衍射(XRD)、傅立叶红外光谱(FTIR)对MMT-B. subtilis复合物进行表征,研究其表面带电性、结构以及层间距的变化情况。结果显示,同MMT与B.subtilis的物理混合物相比,MMT-B.subtilis复合物的ζ电位由7.95mV下降到5.61mV；钠基MMT的d001由1.34nm增加到1.70nm; FTIR图谱显示MMT与细菌表面的水分子之间除了形成氢键外,细菌表面氨基、羧基和羟基也参与了承载反应。正交优化试验得出MMT-B.subti/is复合物的最佳反应条件为：蒙...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第1章 引言
    1.1 蒙脱石及其畜牧上的应用
        1.1.1 蒙脱石的主要作用机制
        1.1.2 蒙脱石对猪生产性能的作用
        1.1.3 蒙脱石对家禽、水产动物生产性能的作用
        1.1.4 蒙脱石与其他药物的协同效应
    1.2 枯草芽孢杆菌及其畜牧上的应用
        1.2.1 枯草芽孢杆菌的生物学及理化特性
        1.2.2 饲用芽孢杆菌的种类
        1.2.3 枯草芽孢杆菌对动物生产性能的影响
    1.3 矿物-微生物的相互作用及研究进展
        1.3.1 矿物与微生物的相互作用
        1.3.2 矿物-微生物相互作用的过程与机理
        1.3.3 矿物-微生物相互作用的影响因素
        1.3.4 矿物与微生物相互作用的研究方法和新技术
    1.4 课题研究的目的、意义及内容
        1.4.1 研究目的和意义
        1.4.2 主要研究内容
第2章 MMT-B.subtilis的制备、表征与制备条件的优化
    2.1 材料与方法
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 试验方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 B.subtilis菌数测定
        2.2.2 MMT-B.subtilis的表征
        2.2.3 MMT-B.subtilis的可逆性与稳定性
        2.2.4 MMT-B.subtilis制备条件的优化
    2.3 讨论
        2.3.1 MMT-B.subtilis的表征
        2.3.2 MMT-B.subtilis制备条件的影响因素
第3章 MMT-B.subtilis对畜禽常见致病微生物的体外抑菌效果
    3.1 材料与方法
        3.1.1 主要仪器与试剂
        3.1.2 供试菌
        3.1.3 培养基
        3.1.4 试验方法
    3.2 结果与分析
        3.2.1 吸光度值(OD)与菌落数(CFU)的标准曲线
        3.2.2 不同浓度的MMT-B.subtilis对四种病原菌的拮抗作用
        3.2.3 B.subtilis、MMT与B.subtilis的混合物和MMT-B.subtilis对四种病原菌拮抗作用的比较
    3.3 讨论
第4章 MMT-B.subtilis对肠黏膜屏障功能的影响
    4.1 材料与方法
        4.1.1 试验材料
        4.1.2 试验方法
    4.2 结果与分析
        4.2.1 显微镜下观察Caco-2细胞的形态
        4.2.2 Caco-2细胞生长曲线
        4.2.3 MMT-B.subtilis对Caco-2细胞的毒性
        4.2.4 MMT-B.subtilis对病原菌黏附和入侵Caco-2细胞的影响
        4.2.5 MMT-B.subtilis对Caco-2细胞膜完整性的影响
    4.3 讨论
        4.3.1 MMT-B.subtilis对Caco-2细胞的毒性
        4.3.2 MMT-B.subtilis对病原菌黏附和入侵Caco-2细胞的影响
        4.3.3 MMT-B.subtilis对Caco-2细胞膜完整性的影响
第5章 总结和展望
    5.1 总结
    5.2 展望
参考文献
硕士期间发表文章
致谢



本文编号：4002316