B亚群禽白血病病毒单克隆抗体的制备

发布时间：2024-04-06 17:45

　　禽白血病是危害我国养禽业的一大病毒性肿瘤病，由于其亚型较多，分布广泛，且垂直传播，因而，对此病的防制和净化有一定难度。在我国的地方品系鸡群中，禽白血病感染呈现较为严重的状态。相关研究学者在过去一段时期内对禽白血病研究偏向于致病性较强的J亚群病毒，而忽略了经典的A/B亚群病毒，这间接的造成了本已存在于我国地方品系鸡群中A/B亚群禽白血病病毒的泛滥。净化地方品系鸡群中A/B亚群禽白血病病毒，成为了当务之急，研制针对性的单克隆抗体，建立标准化检测试剂盒，实现对疾病快速而准确地监控，是需首要完成的任务。 本实验旨在制备针对B亚群禽白血病病毒的单克隆抗体。首先，利用IDEXX公司的AB亚群禽白血病病毒抗体检测试剂盒对山东某地方寿光鸡场鸡群进行检测，结果显示抗体阳性率达70.37%(95/135)。剖检病鸡，观察脏器病理变化，无菌采取表面有肉眼看见肿瘤结节的肝脏、脾脏等脏器，制备组织切片进行观察。将病料冻存于超低温冰箱，作为提取病毒和前病毒DNA的病料。 利用病鸡脾脏提取病毒液，并接种于DF-1细胞扩增病毒。用p27抗原检测试剂盒检测细胞上清，确定病毒存在，并命名为ALV-B-SG12，于超低温冰...

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【部分图文】：

图1禽白血病病毒粒子结构示意图以及电镜下的有囊膜病毒粒子照片(×50K)

图1禽白血病病毒粒子结构示意图以及电镜下的有囊膜病毒粒子照片(×50K)Fig.1TheschematicofALVandviralparticlesassembledundertheelectronmicroscopy核酸和基因组结构及其生物学特性1....

图2ALV的基因组结构图

图2ALV的基因组结构图Fig.2GenomeStructureofALV1.2.2.2复制型和复制缺陷型禽白血病病毒的基因结构特点有一些急性致瘤性白血病病毒基因组的部分gag基因、整个pol基因和部分env基因被某种肿瘤基因所取代，成为复制缺陷型病毒....

图2病鸡的组织病理变化

3.3病鸡组织病理切片观察各脏器的组织切片中均可见大量的肿瘤细胞浸润，如图2。图2病鸡的组织病理变化A:心脏组织中畸形生长的的肿瘤细胞(1000×)；B:肝脏中典型的淋巴样肿瘤细胞(400×)；C:脾脏中的肿瘤细胞(1000×)；D:肺脏中大量肿瘤细胞浸润(4....

图3ALV-B-SG12-gp85的PCR检测结果

图3ALV-B-SG12-gp85的PCR检测结果(DL2000);N:阴性对照;NO.1-4:ALV-B-SG12-gp85PCFig.3DetectionofALV-B-SG12-gp85byPCRL2000);N:Negativecontr....

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