1株鸵鸟铜绿假单胞菌的分离鉴定与进化树分析

发布时间：2024-04-06 22:53

　　目的对内蒙古自治区通辽市某养殖场幼龄鸵鸟致死的致病菌进行分离鉴定与进化树分析。方法无菌采集幼龄病死鸵鸟的内脏,进行细菌分离培养。将分离菌株进行小鼠致病性试验、生化鉴定及药物敏感性试验,并对其进行16S r RNA基因测序,选取比对结果同源性相近的20条序列进行系统进化树分析;PCR扩增ExoT、ExoU、ExoY、ExoS 4个毒力基因,分析分离菌株毒力基因携带情况。结果经细菌形态学鉴定、16S rRNA基因序列Blast比对、BD PhoenixTM100全自动微生物鉴定和药敏系统及部分毒力基因PCR检测得出,该致病菌为铜绿假单胞菌。3种毒力基因ExoT、ExoY、ExoS在该致病菌中被检测,未携带ExoU基因;该菌对环丙沙星、庆大霉素和莫西沙星等13种药物敏感,对头孢唑啉和氯霉素等7种药物耐药。系统进化树分析表明,分离菌株与铜绿假单胞菌中国湖南株(EU915713.1)和中国四川株(KY962357.1)遗传距离最近,并命名为TLTL1。结论该致病菌经鉴定为铜绿假单胞菌,为一种条件致病菌。本研究对铜绿假单胞菌的鉴定及用药提供了参考。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 病料
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 实验动物
    1.4病原菌分离及培养
    1.5 小鼠致病性试验
    1.6 分离菌株的生化鉴定及药物敏感性检测
    1.7 分离菌株16S r RNA基因及4种毒力基因的PCR扩增
        1.7.1 引物设计及合成
        1.7.2 PCR扩增
    1.8 同源性及进化树分析
2 结果
    2.1 细菌形态及培养特性
    2.2 小鼠致病性试验
    2.3 分离菌株的生化特性及药物敏感性
        2.3.1 生化特性
        2.3.2 药物敏感性
    2.4 分离菌株16S r RNA基因及4种毒力基因PCR扩增产物的鉴定
        2.4.1 16S r RNA基因
        2.4.2 毒力基因序列分析
    2.5 16S r RNA基因同源性及遗传进化树分析
3 讨论



本文编号：3947285