布鲁氏菌强弱毒株感染羊白细胞层SSH cDNA文库建立及CD96分子初步研究

发布时间：2024-04-10 00:20

　　布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的危害严重的人畜共患病。近年来，我国动物布病的发病率有所回升。当前控制布病的关键问题是布鲁氏菌致病机制和宿主抵抗布鲁氏菌感染机制不完全清楚。但至今，有关羊抵抗布鲁氏菌感染机制的研究报道较少。强毒株感染导致机体患病，弱毒株感染对机体起到保护作用却不引起患病，说明不同毒力株布鲁氏菌感染可引起机体产生不同的应答反应。因此，比较研究不同毒力株感染机体产生的不同应答分子，能够为预防、治疗、检测布鲁氏菌病提供靶标分子。布鲁氏菌可分为6个种。其中，羊种布鲁氏对我国危害较大。在众多布病疫苗中，猪种布鲁氏菌减毒疫苗S2在我国使用较为广泛。因此，选择羊种布鲁氏菌强毒株和猪种布鲁氏菌弱毒株S2进行比较具有一定的代表性，比较结果更加具有现实意义。 为获得布鲁氏菌强弱毒株感染小尾寒羊差异表达基因，本项研究应用抑制性差减杂交(SSH)技术构建布鲁氏菌强弱毒株感染小尾寒羊SSH cDNA文库。采用鸟枪法对447个文库细菌克隆进行测序。利用荧光定量PCR证实免疫相关备选基因CD96基因在羊种布鲁氏菌(B. melitensis)攻毒小尾寒羊第44天的外周血白细胞层中上调表达。应用RACE技术...

【文章页数】：96 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1-1布鲁氏菌的传播途径Fig.1-1TransmissionofBrucellosis

可为6个种，分别是：羊种布鲁氏菌(Brucellamelitensillaabortus)、猪种布鲁氏菌(Brucellasuis)、绵羊附睾vis)、沙林鼠种布鲁氏菌(Brucellaneotomae)和犬种布鲁其中，羊种布鲁氏菌、牛种布鲁氏菌、猪种布鲁氏菌对人鲁氏....

图1-2布鲁氏菌病的发病过程

图1-2布鲁氏菌病的发病过程Fig.1-2Pathogenesisofbrucellosis布鲁氏菌抗感染免疫然免疫和特异性免疫在抵抗布鲁氏菌感染中都发挥作用。而布鲁氏宿主细胞、抵抗溶菌酶等杀菌物质、抑制宿主细胞凋亡、从宿主细等途径实现其在细胞内的寄生。鲁氏菌在感染宿主....

图1-3菌体数量与机体免疫能力的关系

过粘附宿主细胞、抵抗溶菌酶等杀菌物质、抑制宿主细胞凋亡、从宿主细胞中获取营养等途径实现其在细胞内的寄生。布鲁氏菌在感染宿主过程中，菌体数量与机体的免疫能力的关系见图1-3[24]。图1-3菌体数量与机体免疫能力的关系Fig.1-3Therelationshipbetwe....

图2.1SMARTcDNA合成PCR循环数优化实验Figure2.1OptimizingPCRparametersforSMARTPCRcDNAsynthesis

m/min离心1.5min，收集滤液。ARTPCRcDNA单链cDNA80μL灭菌超纯水172μL10×Advantage2PCRBuffer30μL50×dNTP(10mM)6μL5/PCRprimerIIA6μL50×Advantage2....

本文编号：3949856