RFRP-3在幼龄绵羊组织中的表达及其参与繁殖营养调控的研究

发布时间：2024-05-16 05:31

　　RF酰胺相关肽-3(RFamide-related peptide-3, RFRP-3)是促性腺激素抑制激素(Gonadotropin-inhibitory hormone, GnIH)在哺乳动物体内的同系物,它对动物的生殖、摄食、应激及行为有调节作用。RFRP-3/GnIH在许多物种中的基因序列、结构、表达分布以及生物学功能的研究先后被报道。由于RFRP-3具有调节动物生殖和摄食的双重作用,科学家们推测RFRP-3可能参与动物的繁殖营养调控。目前,对于RFRP-3在绵羊组织中的表达以及其是否参与繁殖营养调控的研究还未见报道。本试验以3月龄雌性绵羊为研究对象,在研究RFRP-3基因在幼龄绵羊各组织中的特异性表达及RFRP-3蛋白在幼龄绵羊卵巢组织中表达定位的基础上,采用限饲的方法首先研究限饲是否影响幼龄绵羊卵巢的发育,然后研究RFRP-3以及GnRHR、FSHR、LHR基因在下丘脑-垂体-卵巢轴的表达。通过以上研究探讨RFRP-3在幼龄绵羊生殖发育过程中的作用,以及其参与繁殖营养调控的机制。1. RFRP-3基因在幼龄绵羊各组织中的表达情况应用普通PCR和荧光定量PCR检测RFRP-3...

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
符号说明(英文缩略词)
引言
第一部分 文献综述
    第一章 RFRP-3/GnIH的研究进展
        1 RFRP-3/GnIH的来源及命名
        2 RFRP-3/GnIH在动物体内的分布
        3 RFRP-3/GnIH的生物学功能
            3.1 RFRP-3/GnIH对生殖的调节
            3.2 RFRP-3/GnIH对摄食的影响
            3.3 RFRP-3/GnIH的其他功能
        4 研究目的及意义
        参考文献
第二部分 试验部分
    第二章 RFRP-3基因在幼龄绵羊各组织中的表达
        1 试验材料和方法
            1.1 试验设计
            1.2 主要试剂和仪器设备
            1.3 组织样采集
            1.4 总RNA的提取
            1.5 RNA的反转录
            1.6 引物设计
            1.7 PCR反应
            1.8 PCR产物的验证
            1.9 荧光定量PCR
            1.10 数据统计分析
        2 结果与分析
            2.1 总RNA提取结果
            2.2 PCR扩增结果
            2.3 测序结果
            2.4 普通PCR验证RFRP-3基因在幼龄绵羊各组织中的表达情况
            2.5 β-actin和RFRP-3基因的标准曲线的绘制
            2.6 荧光定量PCR验证RFRP-3基因在幼龄绵羊各组织中的表达情况
        3 讨论
        4 小结
        参考文献
    第三章 RFRP-3蛋白在幼龄绵羊卵巢中的表达定位
        1 试验材料和方法
            1.1 试验设计
            1.2 主要试剂和仪器设备
            1.3 卵巢组织石蜡切片
            1.4 免疫组化
            1.5 观察结果及统计
        2 结果与分析
        3 讨论
        4 小结
        参考文献
    第四章 限饲对幼龄绵羊卵巢发育的影响
        1 试验材料和方法
            1.1 试验设计
            1.2 试验日粮
            1.3 主要试剂和仪器设备
            1.4 体重、卵巢重和卵巢体积的测量
            1.5 卵巢组织石蜡切片
            1.6 HE染色
            1.7 卵泡计数方法
            1.8 数据统计
        2 结果与分析
            2.1 限饲对幼龄绵羊的卵巢体积、卵巢重、体重和“卵巢重/体重”的影响
            2.2 限饲对卵泡数目、卵泡募集和闭锁影响
        3 讨论
        4 小结
        参考文献
    第五章 限饲对RFRP-3、GNRHR、FSHR和LHR基因在下丘脑-垂体-卵巢轴表达的影响
        1 试验材料和方法
            1.1 试验设计
            1.2 主要试剂和仪器设备
            1.3 组织样采集
            1.4 总RNA的提取
            1.5 RNA的反转录
            1.6 引物设计
            1.7 PCR反应
            1.8 PCR产物的验证
            1.9 荧光定量PCR
            1.10 统计分析
        2 结果与分析
            2.1 PCR扩增结果
            2.2 测序结果
            2.3 GnRHR、FSHR和LHR基因的标准曲线的绘制
            2.4 限饲对RFRP-3基因在下丘脑-垂体-卵巢轴表达的影响
            2.5 限饲对GnRHR基因在下丘脑-垂体-卵巢轴表达的影响
            2.6 限饲对FSHR基因在下丘脑-垂体-卵巢轴表达的影响
            2.7 限饲对LHR基因在下丘脑-垂体-卵巢轴表达的影响
        3 讨论
        4 小结
        参考文献
全文结论
论文创新点
附录
攻读学位期间发表的学术论文
致谢



本文编号：3974763