Orexin A对绵羊黄素化颗粒细胞中StAR、CYP11和3β-HSD的影响

发布时间：2024-05-18 01:56

　　Orexin是一种通过其受体(OX1R和OX2R)发挥功能的神经肽,被分为Orexin A和Orexin B两种。研究发现Orexin的分布非常广泛,参与调节多种生理功能,如对内分泌、生殖活动的调控和调节摄食与能量平衡、以及对药物成瘾的影响等。 为了探索不同浓度Orexin A在不同时间对绵羊卵巢黄素化颗粒细胞中StAR.CYP11和3β-HSD (黄体功能相关基因)的影响,本实验首先对绵羊卵巢颗粒细胞体外培养使其转变成黄素化颗粒细胞,即对颗粒细胞添加LH(2.5IU/ml)、 FSH(2.5IU/ml)、E2(lμg/mL)后培养24h。而后再对该黄素化颗粒细胞添加不同剂量(0.05,0.2,0.5和1μg/mL) Orexin A,分别于刺激后0、2、6、12h和24h提取细胞总RNA,运用qPCR方法检测了Bax/Bcl-2、OX1R以及黄体化相关基因CYP11、3β-HSD、StAR mRNA表达量的变化。结果显示,添加Orexin A后,与对照组相比,Bax/Bcl-2的值显著升高,说明Orexin A可以促进黄素化颗粒细胞凋亡；与对照组相比,2h时1μg/ml Orexin...

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图1-1preproorexin的基因结构⑴]

图1-1preproorexin的基因结构⑴]A:preproorexin;B:preproorexinmRNA;a:信号狀mRNA;b:OrexinAmRNA;c:OrexinBmRNA；▲：信号肽被切断的位点.Fig.1-1Thegene....

图1-3中枢神经系统Orexin纤维的投射[12】Fig.1-3ProjectionofOrexinimmunoreactivefibersincentralnervoussystem

于中枢神经系统下丘脑内" 图1-3""所示为Orexin纤维在中枢神经系统中的映射。对于不同种属的动物来说，Orexin的分布既有相似之处也存在一定种属

图1-4黄体的结构

(Granulosaluteincell)和膜黄体细胞(Thecaluteincell)，见图1-4。

图3-1原代锦羊颗粒细胞及OrexinA处理的黄素化颗粒细胞Fig.3.1PrimaryovinegranulosecellsandluteinizedgranulosacellstreatedwithOrexinA注：A,a,a?：初分离颗粒细胞4X，lOX,20X；B,b,b'：培养24h4X,lOX,20X颗粒细胞：C,c,c':OrexinA

3.1绵羊颗粒细胞的培养及黄素化颗粒细胞的转变光学显微镜下观察到，从绵羊卵泡中初分离出的颗粒细胞呈现为球形（图3-1A,a，a’），培养24h后细胞以单层贴壁形式生长（图3-lB，b，b’）_，多数呈现出梭行或不规则三角形。当细胞生长至80%?90%，出现聚集生长现象。添加Or....

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