鉴别猪伪狂犬病毒gE/gB/gG的纳米PCR及荧光定量PCR方法的建立及评价

发布时间：2024-05-25 14:02

　　猪伪狂犬病毒(porcine pesudorabies virus, PRV)属于疱疹病毒科、疱疹病毒属,颗粒呈球形,成熟的病毒粒子直径约为150-180nm,病毒粒子内部包裹着二十面体的核衣壳,其直径约为100-110nm,基因组位于核衣壳内部,呈卷曲缠绕状排布,核衣壳外部为病毒囊膜,为脂质双分子层结构,囊膜表面为10nm左右的纤突。PRV可以引起多种家畜的感染,其中猪是最主要的储存宿主和传染源,该病毒在猪体内可引起猪伪狂犬病(PR),是一种高度传染性疾病,本病的暴发能够给养猪业带来巨大的经济损失,主要包括妊娠母猪的高流产率、产死胎或者木乃伊胎等繁殖障碍；成年猪的呼吸系统疾病；仔猪神经系统症状、震颤、运动失调、腹泻等。成年猪多耐过而在初生仔猪中死亡率可达100%,耐过的成年猪体内持续带毒并排毒,造成本病的多发。基因缺失苗的免疫是当前防控PRV的主要措施。 本实验运用纳米PCR和荧光定量PCR建立了快速、敏感、检出期早并能鉴别疫苗株还是野毒株的两种诊断方法。其中纳米PCR根据野毒株和疫苗株均存在ga基因而疫苗株缺失gE基因(也存在gG缺失株)的特点,针对全病毒基因组设计了三对引物,分别...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2.1PRV-gB基因的扩增结果

M:DL2000Marker;1；Negativecontrol;23:PRV-gB图2.1PRV-gB基因的扩增结果Fig.2.1TheamplificationofPRV-gB

图2.2PRV纳米PCR退火温度的优化

M:DL2000Marker,1:Negativecontrol;2-11:50-59?C退火温度图2.2PRV纳米PCR退火温度的优化Fig,2.2OptimizationofamplificationtemperatureofPRVnanoP....

图2.3PRV纳米PCR引物浓度的优化

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图2.4PRV纳米PCR模板浓度的优化

M:DL2000Marker;1:Negativecontrol;2-7:0.3-1.8^iL模板添加量图2.4PRV纳米PCR模板浓度的优化Fig.2.4OptimizationoftemplatesconcentrationsofPRVna....

本文编号：3982203