微小隐孢子虫感染绵羊模型的建立

发布时间：2024-07-07 08:36

　　为建立稳定、可靠的微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)感染绵羊模型,将4只2日龄绵羊分成2组,分别经口接种1×10⁶个(低剂量组)和1×10⁷个(高剂量组)的C.parvum卵囊,观察绵羊每日精神状况,并采集粪便样品,提取DNA,用基于TaqMan探针的实时荧光定量PCR方法进行检测,计算每日排卵囊数量。结果表明,两组羔羊均从第4天开始出现精神沉郁、食欲下降及严重的腹泻症状,镜检发现有大量的C.parvum卵囊排出,其中高剂量组的2只羔羊在感染后的第10天死亡。TaqMan实时荧光定量PCR检测结果显示,两组羔羊均从第1天开始有少量的卵囊排出,从第5天开始增多。其中低剂量组的1#羔羊第9天达到高峰,2#羔羊第7天达到高峰,随后排卵囊量开始下降,2只羔羊直到实验结束的第36天仍有卵囊排出,并且首次发现羔羊感染C.parvum后出现3个排卵囊高峰期。高剂量组的2只羔羊均在第6天达到高峰,其中3#羔羊第7天仍然有大量卵囊排出,4#羔羊第7天和第8天仍有大量卵囊排出,随后开始下降;高剂量组羔羊高峰期排卵囊数量明显高于低剂量组羔...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 虫株
        1.1.2 试验用动物
        1.1.3 主要试剂
        1.1.4主要仪器设备
    1.2 方法
        1.2.1 微小隐孢子虫卵囊的纯化
        1.2.2 羔羊接种
        1.2.3 羔羊临床症状观察及粪便样品镜检
        1.2.4 羔羊肠道病理组织学观察
        1.2.5 粪便样品的采集
        1.2.6 DNA的提取
        1.2.7 部分样品的PCR鉴定
        1.2.8 微小隐孢子虫SSU rDNA重组质粒的制备
        1.2.9 粪便样品的TaqMan实时荧光定量PCR检测
2 结果
    2.1 临床症状观察及镜检
    2.2 羔羊肠道组织病理学变化
    2.3 羔羊感染隐孢子虫的分子鉴定
    2.4 微小隐孢子虫TaqMan实时荧光定量PCR方法标准曲线的建立
    2.5 羔羊排卵囊规律
3 讨论



本文编号：4003440