维氏气单胞菌体内诱导抗原基因的筛选及鉴定

发布时间：2024-10-11 21:19

　　近年来，维氏气单胞菌（Aeromonas veronii,AV）已逐渐成为一种重要的人-兽-鱼共患病原菌，其不但可以感染鱼类，而且能够感染包括人、狐狸等哺乳类在内的多种动物。维氏气单胞菌已逐渐开始对人类健康和水产养殖业的发展构成威胁，应当引起我们的重视。目前国内外关于维氏气单胞菌毒力基因的研究并不多见，而且对其致病机理也知之甚少。本研究采用体内诱导抗原技术（In vivo induced antigen technology, IVIAT）对狐狸源致病性维氏气单胞菌CVCC3700（AV CVCC3700）的体内诱导基因进行筛选并鉴定。 首先构建AV CVCC3700基因组表达文库：提取基因组DNA，限制性内切酶Sau3AⅠ随机酶切，优化酶切条件，酶切片段至合适大小，纯化回收酶切片段；BamHⅠ酶切pET-30a/b/c三种表达载体，去磷酸化并回收；将基因组片段与载体连接，电转化入DH5α中，检测片段插入率及大小；提取重组质粒，电转化入表达菌BL21(DE3)，最终获得库容量为6.4×104的基因组表达文库，且片段插入率约为97.5%，完全满足试验要求。 然后收集并处理血清：将A...

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文献综述
    1.1 维氏气单胞菌
    1.2 筛选细菌体内诱导基因技术
    1.3 IVIAT 及其在动物病原菌体内诱导抗原基因筛选中的应用
    1.4 研究目的及意义
第二篇 研究内容
    第一章 AV CVCC3700 基因组表达文库的构建及鉴定
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 结果
        1.4 讨论
        1.5 小结
    第二章 AV CVCC3700 体内诱导抗原特异抗体的制备
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 结果
        2.4 讨论
        2.5 小结
    第三章 AV CVCC3700 基因组表达文库的筛选及鉴定
        3.1 材料
        3.2 方法
        3.3 结果
        3.4 讨论
        3.5 小结
结论
参考文献
作者简介
致谢



本文编号：4007879