尿路致病性大肠杆菌溶血素调控因子鉴定及毒力致弱研究

发布时间：2024-12-17 22:55

　　尿路致病性大肠杆菌(Uropathogenic Escherichia Coli,UPEC)作为肠道外致病性大肠杆菌的一种,可导致膀胱炎、肾盂肾炎及溶血性尿毒症的发生,据统计,约有80%尿路感染由尿路致病性大肠杆菌引起,而在女性当中发病尤为普遍。国内外已有学者对其致病性的分子机制加以深入研究,作为典型的肠道外致病性大肠杆菌,除具备典型的黏附与侵入功能外,UPEC还产生一些毒素成分,如I型细胞坏死因子、α-溶血素、Chu等。溶血素是尿路致病性大肠杆菌重要的毒力因子之一,以其具备裂解红细胞的能力而得名。作为一种成孔毒素,近些年已有部分学者对大肠杆菌溶血素的表现型加以研究,发现其不仅具有裂解细胞的作用,还可通过激活细胞内典型炎症小体进而促进细胞焦亡。但是,溶血素蛋白的表达调控尚不清楚。本实验通过转座子插入失活的方法在无氧培养条件下筛选出影响尿路致病性大肠杆菌CFT073菌株溶血活性的基因位点,共筛选到包含溶血素操纵子在内的14个转座子插入位点,其中包括钼辅因子(moco)合成相关基因mobA、moeB、mogA,全局调控因子fnr,膜转运蛋白tatB及Fe-S簇合成伴侣蛋白hscA等。我们针对...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1尿道致病性大肠杆菌致病机理(来自MatthewA.Croxen,2010)

,2007;SIMMSandMOBLEY,2008)。研究表明，在肾脏感染的过程中，UPEC关闭了I型菌毛的表达，使细菌能够顺利的通过膀胱及输尿管上行至肾脏，并在肾脏组织中表达P菌毛，而P菌毛与肾脏上皮细胞表面的Galα(1–4)Galβ受体相结合，帮助UPEC完成对肾脏上皮细胞....

图1-2溶血素对不同细胞类型的影响(来自LauraC.Ristow,2015)

祝?HlyA可直接导致红细胞的裂解，此外，HlyA通过间接刺激P2X受体，导致细胞内钙离子大量内流引起宿主细胞内离子水平的改变(SKALSetal.,2009)。溶血素针对不同种类的宿主细胞，产生的影响也有一定的差异，这也意味着编码溶血素毒力岛的UPEC对宿主的影响也随宿主感染的....

图1-3大肠杆菌中Moco的生物合成(来自ChantalIobbi-Nivol,2012)

中国农业科学院硕士学位论文第一章绪论7(NEUMANNandLEIMKüHLER,2008)。最后，对Moco进行进一步修饰形成MPT-鸟嘌呤二核苷酸辅因子（MGD）或MPT-胞嘧啶二核苷酸辅因子（MCD）。在大肠杆菌中，对于DMSO还原酶家族的酶，Moco在MobA蛋白的催化下....

图2-1不同培养条件

中国农业科学院硕士学位论文第二章尿路致病性大肠杆菌无氧条件下溶血素调控因子的筛选11以第一轮PCR的产物为模板，引物Arbi2和TnSc137-Rnest进行第二轮PCR。PCR扩增体系：Taq-mix（2×）25μLArbi2（10μM）2μLTnSc137-Rnest（10μ....

本文编号：4016656