复方中药对肉鸡腹水综合征肺组织内皮活性因子的作用机制研究

发布时间：2017-06-14 06:10

  本文关键词：复方中药对肉鸡腹水综合征肺组织内皮活性因子的作用机制研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：肉鸡腹水综合征(Ascites syndrome, AS)发生过程中,肺的病理变化表现为肿大、充血。肺组织富含血管,其血管内皮结构和功能的紊乱与其病变的发生密切相关。近年来,针对中药防治肉鸡腹水综合征的研究广泛并取得了良好效果。本试验根据本课题组前期研究结果设计,通过研究复方中药对肺组织内皮活性因子的调控作用,阐明其对肉鸡腹水综合征的防治机制。方法：试验采用低温、在饮水中添加0.12%NaCl、在饲料中添加3%猪油和4%鱼粉的多因素方法诱导AA肉鸡发生腹水模型。试验动物分为6组：空白组、模型组、复方中药高剂量组(2 mL/kg·d)、复方中药中剂量组(1mL/kg·d)、复方中药低剂量组(0.5mL/kg·d)和阳性药物组(1% L-Arg)。于15、25、35、45日龄,每组随机抽取5羽,病理解剖并取心肺组织。检测腹水心脏指数(Ascites heart index, AHI),实时荧光定量法和ELISA法测定肉鸡肺组织(按目录中的先后顺序出场写)血管黏附因子(VCAM1)、血管内皮源性因子(EGFL7、VEGF和VEGFR2)及细胞增殖信号通路中负性调控因子(SPRED1、PI3KR2)的基因和蛋白表达水平,研究复方中药对AS的防治效果及作用机制。试验结果如下：1、AS模型肉鸡精神萎靡,肢体倦怠；腹部膨大且皮肤变薄发亮,触之有波动感,剖解时可抽出200-500mL不等的黄色积液,有的清亮透明,有的混有絮状物；剖解可见心包积液,右心肥大,肝、肺肿大,充血或瘀血,部分鸡肾脏肿大、充血。2、与空白组相比,25、35、45日龄模型组AHI显著升高(P0.01)：与模型组相比,25、35、45日龄复方中药高剂量组、中剂量组和L-Arg组AHI显著降低(P0.01,P0.05)。3、与空白组相比，各检测日龄模型组肺组织EGFL7 mRNA相对表达量显著升高(P0.01)；与模型组相比,各检测日龄复方中药高剂量组和L-Arg组肺组织EGFL7 mRNA相对表达量显著降低(P0.01),15、25、35日龄复方中药中剂量组以及35日龄复方中药低剂量组肺组织EGFL7 mRNA相对表达量均显著降低(P0.01)。与空白组相比,各检测日龄模型组肺组织EGFL7蛋白表达量显著升高(P0.01)；与模型组相比,各检测日龄复方中药高剂量组肺组织EGFL7蛋白表达量显著降低(P0.01,P0.05),15、25、35日龄复方中药中剂量组和L-Arg组以及15日龄复方中药低剂量组肺组织EGFL7蛋白表达量显著降低(P0.01)。4、与空白组相比,25、35、45日龄模型组肺组织VEGF mRNA相对表达量显著升高(P0.01)：与模型组相比,25、35、45日龄复方中药高剂量组、中剂量组和L-Arg组肺组织VEGF mRNA目对表达量显著降低(P0.01,P0.05)。与空白组相比,各检测日龄模型组肺组织VEGF蛋白表达量显著升高(P0.01)；与模型组相比,各检测日龄复方中药高剂量组和L-Arg组肺组织VEGF蛋白表达量显著降低(P)0.01),15、35、45日龄复方中药中剂量组肺组织VEGF蛋白表达量显著降低(P0.01)。5、与空白组相比,各检测日龄模型组肺组织VEGFR2 mRNA相对表达量显著升高(P0.01)；与模型组相比,15、25、45日龄复方中药高剂量组和L-Arg组肺组织VEGFR2 mRNA相对表达量显著降低(P0.01),25、35、45日龄复方中药中剂量组肺组织VEGFR2 mRNA相对表达量显著降低(P0.01),15、45日龄复方中药低剂量组肺组织VEGFR2 mRNA相对表达量显著降低(P0.01)。与空白组相比,各检测日龄模型组肺组织VEGFR2蛋白表达量显著升高(P0.01)；与模型组相比,各检测日龄复方中药高剂量组肺组织VEGFR2蛋白表达量显著降低(P0.01,P0.05),25、35日龄复方中药中剂量组以及35、45日龄L-Arg组肺组织VEGFR2蛋白表达量显著降低(P0.01)。6、与空白组相比,各检测日龄模型组肺组织VCAM1 mRNA相对表达量显著升高(P0.01)；与模型组相比,各检测日龄复方中药高剂量组肺组织VCAM1 mRNA相对表达量显著降低(P0.01),15、25日龄复方中药中剂量组以及15、25、35日龄L-Arg组肺组织VCAM1 mRNA相对表达量显著降低(P0.01,P0.05)。与空白组相比,各检测日龄模型组肺组织VCAM1蛋白表达量显著升高(P0.01)；与模型组相比,各检测日龄复方中药高剂量组、中剂量组和L-Arg组肺组织VCAM1蛋白表达量显著降低(P0.01),15、35日龄复方中药低剂量组肺组织VCAM1蛋白表达量显著降低(P0.05)。7、与空白组相比,25、35、45日龄模型组肺组织SPRED1 mRNA相对表达量显著降低(P0.01)：与模型组相比,25、35、45日龄复方中药高剂量组肺组织SPRED1 mRNA相对表达量显著升高(P0.01),45日龄复方中药中剂量组SPRED1 mRNA相对表达量显著升高(P0.05),25、45日龄L-Arg组肺组织SPRED1 mRNA相对表达量显著升高(P0.01,P0.05)。与空白组相比,25、35、45日龄模型组肺组织SPRED1蛋白表达量显著降低(P0.01)；与模型组相比,35、45日龄复方中药高剂量组和L-Arg组肺组织SPRED1蛋白表达量显著升高(P0.01,P0.05),45日龄复方中药中剂量组、低剂量组肺组织SPRED1蛋白表达量显著升高(P0.05)。8、与空白组相比,25、35、45日龄模型组肺组织PI3KR2 mRNA相对表达量显著降低(P0.01)；与模型组相比,25、35、45日龄复方中药高剂量组和L-Arg组肺组织PI3KR2 mRNA相对表达量显著升高(P0.01),35日龄复方中药中剂量组以及45日龄复方中药低剂量组肺组织PI3KR2 mRNA相对表达量显著升高(P0.05)。与空白组相比,各检测日龄模型组肺组织PI3KR2蛋白表达量显著降低(P0.01)；与模型组相比,各检测日龄复方中药高剂量组、中剂量组和L-Arg组肺组织PI3KR2蛋白表达量显著升高(P0.01,P0.05)。9、与空白组相比，35日龄模型组肺组织miR-126-3p相对表达量显著升高(P0.01)；与模型组相比,35日龄复方中药高剂量组肺组织miR-126-3p相对表达量显著降低(P0.01)。结论：1.AS肉鸡肺组织VCAM1、EGFL7、VEGF、VEGFR2 mRNA相对表达量和蛋白表达量升高,SPRED1、PI3KR2 mRNA相对表达量和蛋白表达量下降,miR-126-3p相对表达量升高,它们参与了AS病变发生发展；2.本试验所用复方中药能下调AS肉鸡肺组织VCAM1、EGFL7、VEGF、VEGFR2mRNA相对表达量和蛋白表达量,上调SPRED1、PI3KR2 mRNA相对表达量和蛋白表达量,下调miR-126-3p表达量,复方中药对AS肉鸡肺组织内皮活性因子具有调控作用,是其有效防治AS病变的机制之一。
【关键词】：复方中药 肉鸡腹水综合征 肺组织 血管内皮细胞活性因子 肺动脉高压 血管内皮增殖
【学位授予单位】：山西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.31
【目录】：

• 摘要8-11
• 文献综述11-21
• 1 肉鸡腹水综合征与肺动脉高压11-12
• 1.1 肉鸡腹水综合征简介11
• 1.2 发病机理11-12
• 1.3 肉鸡腹水综合征的防治12
• 2 血管内皮与肺动脉高压12-15
• 2.1 内皮细胞12-15
• 2.2 血管内皮细胞在肺动脉高压发生过程中的作用15
• 3 中医药与血管内皮细胞15-16
• 3.1 中医脉络与血管系统15-16
• 3.2 中医药对血管内皮细胞的调节作用16
• 4 microRNA16-21
• 4.1 miRNA生物合成与调控机制17-18
• 4.2 miRNA研究意义18
• 4.3 miRNA与肺动脉高压18-19
• 4.4 miRNA与血管内皮细胞19-21
• 试验一 复方中药对肉鸡腹水综合征肺组织内皮增殖相关活性因子的影响21-38
• 1 试验材料21-22
• 1.1 试验动物21
• 1.2 复方中药的制备21
• 1.3 主要试剂21-22
• 1.4 主要仪器22
• 2 试验方法22-26
• 2.1 动物分组与造模22-23
• 2.2 样品采集23
• 2.3 指标检测23-26
• 2.4 统计学分析26
• 3 试验结果与分析26-34
• 3.1 临床症状与腹水心脏指数26-27
• 3.2 总RNA的提取与检测27-28
• 3.3 目标基因EGFL7、VEGF和VEGFR2扩增28
• 3.4 各组肉鸡肺组织EGFL7 mRNA和蛋白表达28-30
• 3.5 各组肉鸡肺组织VEGF mRNA和蛋白表达30-32
• 3.6 各组肉鸡肺组织VEGFR2 mRNA和蛋白表达32-34
• 4 讨论34-37
• 4.1 内皮源性增殖相关活性因子在肉鸡腹水综合征发生发展过程中的作用34-35
• 4.2 复方中药防治肉鸡腹水综合征机制分析35-36
• 4.3 L-精氨酸防治肉鸡腹水综合征机制分析36-37
• 5 小结37-38
• 试验二 复方中药对肉鸡腹水综合征肺组织VCAM1表达的影响38-44
• 1 试验材料38
• 1.1 试验动物38
• 1.2 复方中药的制备38
• 1.3 主要试剂38
• 1.4 主要仪器38
• 2 试验方法38-39
• 2.1 动物分组与造模38
• 2.2 样品采集38
• 2.3 指标检测38-39
• 2.4 统计学分析39
• 3 试验结果与分析39-42
• 3.1 目标基因VCAM1扩增39-40
• 3.2 各组肉鸡肺组织VCAM1 mRNA和蛋白表达40-42
• 4 讨论42
• 4.1 黏附分子在肉鸡腹水综合征发生发展中的作用42
• 4.2 复方中药防治肉鸡腹水综合征机制分析42
• 5 小结42-44
• 试验三 复方中药对肉鸡腹水综合征肺组织细胞增殖负性调控相关活性因子的影响44-51
• 1 试验材料44
• 1.1 试验动物44
• 1.2 复方中药的制备44
• 1.3 主要试剂44
• 1.4 主要仪器44
• 2 试验方法44-46
• 2.1 动物分组与造模44-45
• 2.2 样品采集45
• 2.3 指标检测45
• 2.4 统计学分析45-46
• 3 试验结果与分析46-50
• 3.1 目标基因SPRED1、PI3KR2扩增46
• 3.2 各组肉鸡肺组织SPRED1 mRNA和蛋白表达46-48
• 3.3 各组肉鸡肺组织PI3KR2 mRNA和蛋白表达48-50
• 4 讨论50
• 5 小结50-51
• 试验四 复方中药对肉鸡腹水综合征肺组织miR-126表达的影响51-56
• 1 试验材料51
• 1.1 试验动物51
• 1.2 复方中药的制备51
• 1.3 主要试剂51
• 1.4 主要仪器51
• 2 试验方法51-54
• 2.1 动物分组与造模51
• 2.2 样品采集51-52
• 2.3 指标检测52-54
• 2.4 统计学分析54
• 3 试验结果与分析54
• 4 讨论54-55
• 5 小结55-56
• 全文结论56-57
• 参考文献57-64
• Abstract64-68
• 附录一：英文缩略词对照表68-69
• 附录二：ELISA试验标准曲线69-70
• 致谢70

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李艳华;佟恒敏;闫清波;于康震;;应用药物累积法研究复方中药Ⅱ的药代动力学研究[J];中国兽医杂志;2007年07期

2 张佳;蔡景义;左之才;耿毅;谢江;;复方中药清增康对断奶仔猪血液生理生化指标的影响[J];黑龙江畜牧兽医;2009年03期

3 张彩云;李忠建;孙继峰;韩坤;;酶解“安胎复方中药”的工艺参数研究[J];饲料工业;2006年22期

4 贾召锋;王卓然;杨超;张哲;吴金迪;丛郢颖;于文会;;复方中药促进创伤愈合作用效果研究[J];中兽医医药杂志;2011年02期

5 李慧峰;单明辉;李子平;;复方中药免疫增强剂的初步筛选及其毒性作用研究[J];安徽农业科学;2012年31期

6 方素芳;钟秀会;任成林;崔平;张瑞华;;复方中药治疗急性弓形虫病的试验研究[J];河北北方学院学报(自然科学版);2006年02期

7 曲伟杰;李进军;王生奎;;一剂复方中药对家兔骨骼愈合的影响[J];中国畜牧兽医;2011年07期

8 傅晨;欧阳五庆;尚朋朋;王t

本文编号：448700