miR-122和miR-449a在草原红牛睾丸组织不同发育阶段的表达规律及其功能

发布时间：2017-06-20 07:07

  本文关键词：miR-122和miR-449a在草原红牛睾丸组织不同发育阶段的表达规律及其功能，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：本研究以中国草原红牛为研究对象,采用实时荧光定量PCR方法检测了miR-122、miR-185、miR-146b、miR-140、miR-449a、miR-204、miR-375、miR-221在草原红牛不同发育时期睾丸组织和以及其他组织中的表达差异,筛选出在睾丸中特异表达或倾向表达的miRNA,并通过预测软件对选择对miRNA进行靶基因预测,构建双荧光素酶报告载体。初步阐明这8个miRNAs调控睾丸发育的分子机制,为中国草原红牛公牛发育的遗传机理和在肉牛生产中进行分子育种提供了理论基础。本研究主要结果如下:通过对miR-122、miR-185、miR-146b、miR-140、miR-449a、miR-204、miR-375、miR-221草原红牛不同组织中相对表达量水平分析,它们在各组织中有不同程度的表达,其中mir-122和mir-449a在草原红牛睾丸中相对表达量较高,miR-122、miR-449a在睾丸中具有倾向性表达的特点,而且miR-122在睾丸中的表达量与其它组织相比差异极其显著。这8个miRNA在在不同发育阶段牛睾丸组织中的相对表达量差异显著,miR-221和miR-204在初生牛中相对表达量最高,miR-140和miR-185在12月龄睾丸中表达量最高,miR-449a、miR-375、miR-146b和miR-122在24月龄睾丸中相对表达量最高。这8个miRNA的荧光定量结果与课题组前期出生公牛和24月龄公牛solexa高通量测序结果一致,miR-146b、miR-449a、miR-375和miR-122表达上调,miR-185、miR—140、miR-204和miR-221表达下调。通过软件预测miR-122可能的靶基因有MAF1、PDK4、DUSP4、FUT8、PRKRA,miR-449a可能的靶基因FKBP1B,3'UTR区进行扩增,插入到PGL3-control载体构建构建双荧光素酶报告载体,与pre-mir共同转入牛脂肪细胞中,通过多功能酶标仪检测荧光素酶活性。结果验证,DUSP4和FKBP1B可能分别是是miR-122和miR-449a的靶基因。本研究分析了miRNAs在不同发育阶段睾丸组织及其他组织中的表达差异,预测了睾丸组织中高表达mir-122和mir-449a的靶基因,并进行了体外验证,为以后研究miRNA对肉牛生殖器官的发育及生殖活动的调控机理具有重要作用。
【关键词】：草原红牛 睾丸组织 miR-122 miR-449a DUSP4 FKBP1B
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S823
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-8
• 第一篇 文献综述8-17
• 第一章 miRNA的研究进展概述8-14
• 1.1 miRNA概述8
• 1.2 miRNA生物合成8-9
• 1.3 miRNA的作用机制9
• 1.4 miRNA的表达检测9-12
• 1.5 miRNA靶基因的预测12-13
• 1.6 miRNA靶基因的验证13-14
• 第二章 雄性哺乳动物的繁殖机制14-17
• 2.1 精子发生过程14
• 2.2 miRNAs与精子发生的关系14-15
• 2.3 睾丸组织中miRNAs的表达15-16
• 2.4 本研究的目的和意义16-17
• 第二篇 研究内容17-46
• 第一章 材料与方法17-29
• 1.1. 实验材料17-19
• 1.2. 试验方法19-29
• 第二章 结果29-41
• 2.1 mi RNAs在不同组织中的表达规律分析29-31
• 2.2 mi RNAs在不同发育阶段牛睾丸中表达规律分析31-35
• 2.3 miR-122和miR-449a的靶基因验证35-41
• 第三章 讨论41-46
• 3.1 生物信息对miRNA靶基因的预测41
• 3.2 关于本实验靶基因的预测41
• 3.3 miR-122和miR-449a在牛睾丸组织中的调控靶基因的机制41-43
• 3.4 miR-122调控睾丸组织的功能43
• 3.5 miR-449a调控睾丸组织的功能43-44
• 3.6 关于引物的设计44
• 3.7 关于载体构建44-45
• 3.8 不足之处45-46
• 结论46-47
• 参考文献47-52
• 作者简介52-53
• 致谢53

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 胡成华,张国梁,于洪春,王国华,付刚,刘基伟,刘向才,毛学礼;草原红牛导入丹麦红牛血的研究[J];吉林农业科学;2005年02期

2 ;四省区“草原红牛”育种协作座谈会简讯[J];吉林农业科学;1975年02期

3 徐文光;;内蒙古草原红牛育种通过技术鉴定[J];中国农垦;1984年11期

4 ;内蒙古草原红牛 培育成功正式命名[J];中国良种黄牛;1985年01期

5 ;内蒙古草原红牛培育成功[J];饲料研究;1985年08期

6 沙尔夫;王军;达来;;草原红牛导入丹麦红牛血液的效果[J];内蒙古畜牧科学;1990年02期

7 张玉;布和;张立岭;李淑荣;;草原红牛若干数量性状遗传参数的预测[J];内蒙古农牧学院学报;1993年03期

8 李向阳,张嘉保,赵玉民,胡成华;草原红牛微卫星DNA多态性的研究[J];中国草食动物;2004年03期

9 李向阳,张嘉保,赵玉民,胡成华,杨国忠;微卫星标记在草原红牛遗传育种中的应用[J];畜牧与饲料科学;2004年03期

10 杨国忠,任文陟,张嘉保,赵玉民,胡成华,张国梁;草原红牛群体中微卫星DNA多态性的研究[J];动物医学进展;2004年05期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 胡成华;张国梁;刘基伟;赵玉民;于洪春;刘向财;王国华;吴健;毛学礼;;草原红牛导入利木赞血的研究[A];第二届中国牛业发展大会论文集[C];2007年

2 李旭;胡成华;吴健;刘基伟;张鹏举;丁晓伟;张国梁;赵玉民;;不同营养水平对草原红牛及其肉用群体肉用性能的影响[A];《2009中国牛业进展》论文集[C];2009年

3 杨国忠;张嘉保;赵玉民;胡成华;任文陟;张国梁;;草原红牛肉用性能微卫星标记的研究[A];中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集（上册）[C];2004年

4 胡成华;张国梁;刘基伟;;草原红牛导入利木赞血产肉性能研究[A];全国养牛科学研讨会暨中国畜牧兽医学会养牛学分会第六届会员代表大会论文集[C];2005年

5 张国梁;吴健;李旭;刘基伟;胡成华;秦立红;赵志辉;赵玉民;;IGFBP5基因在草原红牛阉割牛与公牛不同组织中的表达差异[A];中国畜牧兽医学会养牛学分会2011年学术研讨会论文集[C];2011年

6 秦立红;张国良;赵玉民;廉传江;张金玉;杨春;刘晶;呼正祥;赵志辉;;草原红牛不同生长发育时期背最长肌基因表达谱的构建[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年

7 刘博洋;秦立红;廉传江;芦春艳;张金玉;姜昊;赵志辉;杨润军;;草原红牛CAPN3基因外显子1的多态性分析及对胴体性状的影响[A];第十二次全国畜禽遗传标记研讨会论文集[C];2010年

8 秦立红;赵志辉;;草原红牛背最长肌中IGFs基因表达的发育性变化[A];第十二次全国畜禽遗传标记研讨会论文集[C];2010年

9 秦立红;李旭;吴健;刘基伟;胡成华;赵玉民;张国梁;赵志辉;;CAPN1基因在草原红牛初生牛与成年牛8种组织中的表达差异[A];中国畜牧兽医学会养牛学分会2011年学术研讨会论文集[C];2011年

10 张嘉保;郭丹;曹阳;金海国;赵玉民;张国梁;;草原红牛MSTN基因第一外显子SNPs分析[A];第十次全国畜禽遗传标记研讨会论文集[C];2006年

中国重要报纸全文数据库 前9条

1 都基刚 记者 高大伟;草原红牛扩繁率骤增20倍[N];吉林日报;2005年

2 陈宝林;通榆牛羊超百万[N];吉林日报;2006年

3 央施;用草原红牛做“保姆”养牛犊卖出好价钱[N];中国畜牧兽医报;2008年

4 孙玉峰 本报记者 李洪君;三业并举奔富路[N];吉林日报;2001年

5 记者 曹梦南;通榆加快推广高档肉牛品种[N];吉林日报;2011年

6 本报记者 林加占;火热的盛会 火红的明天[N];吉林农村报;2006年

7 记者 王朝霞;州畜牧局不断强化行业作风建设[N];甘南日报(汉文版);2007年

8 实习生 纪虹宇 本报记者 潘锐;火热 新颖[N];吉林日报;2006年

9 ;科技项目[N];经济日报.农村版;2004年

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 赵玉民;草原红牛及其改良群体遗传与营养互作研究[D];吉林农业大学;2007年

2 秦立红;草原红牛初生公牛与成年公牛背最长肌基因表达差异分析[D];吉林大学;2010年

3 王小梅;内蒙古地区不同品种肉牛生产性能和肉品质及脂肪代谢相关基因mRNA表达量的比较研究[D];内蒙古农业大学;2012年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王晓楠;草原红牛和荷斯坦牛肌肉组织差异表达基因筛选及肉质性状相关基因分析[D];吉林农业大学;2015年

2 朱超杰;miR-122和miR-449a在草原红牛睾丸组织不同发育阶段的表达规律及其功能[D];吉林农业大学;2016年

3 安忠柱;草原红牛肉用性状种质特性研究[D];吉林大学;2008年

4 刘浩;草原红牛单引物微卫星DNA多态性与屠宰性状相关研究[D];吉林大学;2006年

5 许文竞;不同遗传基础草原红牛消化代谢差异性研究[D];吉林农业大学;2007年

6 李向阳;草原红牛微卫星DNA多态性的研究[D];吉林大学;2005年

7 郭艳荣;草原红牛生长及绝食代谢研究[D];吉林农业大学;2012年

8 李爽;草原红牛乳加工特性研究[D];吉林大学;2013年

9 俞美子;草原红牛部分数量性状的遗传参数及育种值的估计[D];延边大学;2001年

10 文力正;草原红牛改良群体生产性能及H-FABP基因SNP与肉质性状的相关分析[D];吉林大学;2007年

  本文关键词：miR-122和miR-449a在草原红牛睾丸组织不同发育阶段的表达规律及其功能，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：464774