A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1在杆状病毒系统中的表达及鉴定
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【摘要】:为在杆状病毒表达系统中表达口蹄疫病毒(FM D V)结构蛋白VP1,利用限制性酶切位点将VP1基因插入到杆状病毒表达载体pFastBacHTB,得到重组转移载体p FastBacHTB-VP1,并将其转化至DH10Bac感受态细胞进行蓝白斑筛选。将鉴定正确的重组杆状病毒质粒转染Sf9细胞后收获重组杆状病毒rBacHTB-VP1,通过间接免疫荧光(IFA)和蛋白质印迹(Western-blot)鉴定结构蛋白VP1的表达情况。IFA结果表明结构蛋白VP1能够在昆虫细胞中表达;Western-blot检测到32 ku左右的表达产物,与预期结果相符,且能够被A型FMDV豚鼠阳性超免疫血清所识别。上述结果表明,经杆状病毒真核表达系统表达的可溶性蛋白VP1具有良好的反应原性,为进一步研究A型口蹄疫病毒结构蛋白的免疫原性以及研制新型口蹄疫亚单位疫苗提供了实验依据。
【作者单位】: 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室;
【关键词】: 口蹄疫病毒 VP蛋白 杆状病毒 表达
【基金】:“十二五”国家高技术研究发展计划(863)项目(2011AA10A211) 国家生猪产业体系项目(CARS-36-06B)
【分类号】:S852.65
【正文快照】: 口蹄疫(foot-and-m outh disease,FMD)是由口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)感染牛、猪、绵羊、山羊等动物所引起的一种急性、热性和高度接触性传染病,对畜牧业造成重大的经济损失和不良的政治影响[1]。目前,该病在我国以及非洲和亚洲的许多国家流行,其传播速度
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