富硒酵母的研制及其对大鼠生长发育的影响

发布时间：2017-07-14 00:30

  本文关键词：富硒酵母的研制及其对大鼠生长发育的影响

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【摘要】：青藏高原包括西藏、青海、四川西部和新疆南部山地等广大地区,占国土面积26%,平均海拔4000~5000m,由于其独特的地质结构、草地类型、高寒气候等环境因素,造成青藏高原普遍缺硒。硒的缺乏不仅与人大骨节病和克山病有一定联系,同时导致牦牛和藏羊的白肌病、生长缓慢、腹泻等缺硒病的发生。研究表明补硒可以提高缺硒地区动物的生长性能,农业部饲料添加剂目录(2013)表明补硒的方式是亚硒酸钠和酵母硒,其中酵母硒在提供硒源的同时酵母菌本身还富含蛋白质、糖类和维生素,生物利用度高。本课题的目的是从牦牛传统发酵酸奶里分离得到的酵母菌中筛选出一株富硒能力好的酵母菌,以此为载体研制富硒酵母菌,为青藏高原地区硒缺乏病的防控提供食品级的补硒材料。本试验取得的成果如下:一成功研制出硒含量较高的富硒酵母菌为了筛选出富硒能力好的酵母菌,本试验选用分离自牦牛酸奶的2株酿酒酵母菌、1株发酵毕赤酵母菌和1株马克思克鲁维酵母菌,通过将种子液(1×105CFU/m L)涂布在硒含量为0、5、10…90μg/m L的耐硒平板上比较耐硒能力,结果发现酿酒酵母SWUN5668和SWUN5696的耐硒量为20μg/m L、发酵毕赤酵母SWUN5680和马克思克鲁维酵母SWUN5666的耐硒量是15μg/m L。在此基础上,为了测定4个菌株的富硒能力,在60m LYEPD发酵液(硒水平15μg/m L)中加入酵母菌(1×107 CFU/m L)培养36h,比较不同酵母菌的活菌数、生物量及硒含量,发现酿酒酵母SWUN5668的活菌数和生物量最高,分别是6.5×107CFU/m L和0.1400g,富硒量为35.84μg。因此通过两个试验的筛选,确定以SWUN5668作为载体研制富硒酵母菌,并采用OD值法结合平板活菌计数法测定其生长曲线,结果显示该菌株的适应期是0-4h,对数期是4-10h,平台期是10-68h,在68-72h进入衰亡期,24h时活菌数达到最大值,约为1.05×108CFU/m L。通过对培养时间和不同加硒浓度的测定得出的优化条件是酵母菌生长10h时添加15μg/m L亚硒酸钠继续培养至36h,活菌数和生物量分别是8.35×107CFU/m L、3.23g/L,用国标法测定该富硒酵母菌硒含量为1553μg/g。因此本试验成功研制出硒含量较高的富硒酵母菌,为青藏高原人和动物硒的补充提供了有效材料。二富硒酵母对大鼠生长发育的影响为了评价本试验研制的富硒酵母菌在动物体内的效果,选用21日龄健康级Wistar雄性大鼠作为试验动物,分成7组,每组18只,第1组为空白组(仅饲喂缺硒基础日粮,硒含量0.027mg/kg);第2~4组为对照组(分别饲喂对应总量的载体酵母菌);第5~7组为处理组(饲喂添加不同剂量富硒酵母的基础日粮,含硒量分别为0.05mg/kg、0.2 mg/kg和0.5 mg/kg),饲喂8周,从实验开始每间隔1周称重,并在第4、6、8周各组随机取6只大鼠分别进行心脏采血、肠道、脏器和肌肉取样,以此评价富硒酵母对大鼠生长性能、肠道发育、生殖发育及组织硒沉积的作用效果。结果表明补饲硒浓度0.05和0.2mg/kg组大鼠的平均日增重显著高于空白组和对照组(P0.05),0.5mg/kg组与对照组相比日增重增高但作用不显著,与空白组相比效果极显著(P0.01);补硒组能促进大鼠小肠肠绒毛发育,其中,对十二指肠的作用效果最好,空肠其次,对回肠的效果不明显;高浓度硒(0.5mg/kg)在第8周能明显增加睾丸曲细精管管腔内的精子数量,对附睾生长发育不明显;补饲硒浓度0.2mg/kg和0.5mg/kg组在第4周和第8周可以显著增加大鼠肝脏和血液硒含量(P0.05),在第8周肌肉硒含量随硒添加量显著增加(P0.05);硒对血清睾酮和睾丸谷胱甘肽过氧化酶的影响没有显著性差异,0.2mg/kg和0.5mg/kg硒水平在第8周能显著提高肝脏谷胱甘肽过氧化物酶的活性,0.2mg/kg硒水平在第8周显著提高血清谷胱甘肽过氧化物酶的活性(P0.05)。因此,本试验研制的富硒酵母能增高大鼠日增重,促进肠道发育,增加可食用部位硒含量。
【关键词】：富硒酵母 硒含量 大鼠 生长发育
【学位授予单位】：西南民族大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S816
【目录】：

• 摘要3-5
• Abstract5-10
• 第一部分 综述 硒的生物学作用及其在养殖中的应用10-16
• 1 硒的生物学作用10-13
• 1.1 硒在生长发育的作用11-12
• 1.2 硒对免疫功能的作用12
• 1.3 硒对生殖系统的作用12-13
• 2 富硒酵母在畜禽生产上的应用13-15
• 2.1 富硒酵母在家禽和猪群中的应用13-14
• 2.2 富硒酵母在反刍动物中的应用14-15
• 3 问题与展望15-16
• 第二部分 试验研究16-44
• 第一章 富硒酵母菌的研制16-29
• 1 材料与方法16-19
• 1.1 试验材料16-17
• 1.2 试验方法17-19
• 2 结果与分析19-26
• 2.1 四株酵母菌株耐硒能力19-21
• 2.2 富硒菌株的筛选21-22
• 2.3 酿酒酵母富硒培养条件的优化22-24
• 2.4 酵母菌加硒浓度的确定24-25
• 2.5 硒标准曲线的绘制25-26
• 2.6 富硒酵母菌的优化26
• 3 讨论26-27
• 3.1 硒的测定方法26
• 3.2 不同酵母菌株富硒能力的差别26-27
• 3.3 酿酒酵母生长特点对富硒效果的影响27
• 4 小结27-29
• 第二章 富硒酵母对大鼠生长发育的影响29-43
• 1 材料与方法29-32
• 1.1 主要试剂和仪器29
• 1.2 富硒酵母菌和基础日粮29-30
• 1.3 试验动物与分组30-31
• 1.4 试验设计与饲养管理31
• 1.5 样本采集31-32
• 1.6 数据处理与分析32
• 2 结果32-39
• 2.1 酵母菌和富硒酵母对大鼠生长性能的影响32-33
• 2.2 富硒酵母对大鼠肠道形态学上的影响33-35
• 2.3 酵母菌和富硒酵母对大鼠生殖系统的影响35-37
• 2.4 饲喂富硒酵母菌对大鼠组织器官及血液硒含量的影响37-38
• 2.5 富硒酵母对大鼠脏器谷胱甘肽过氧化物酶的影响38-39
• 2.6 富硒酵母对大鼠血清睾酮的影响39
• 3 讨论39-42
• 3.1 富硒酵母对大鼠体增重的影响39-40
• 3.2 富硒酵母对大鼠小肠发育的影响40
• 3.3 富硒酵母对大鼠生殖系统的影响40-41
• 3.4 富硒酵母血清和肝脏谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响41
• 3.5 富硒酵母对大鼠组织硒沉积的影响41-42
• 4 小结42-43
• 第三章 结论与创新点43-44
• 1 结论43
• 2 创新点43-44
• 参考文献44-51
• 致谢51-52

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本文编号：538975