大豆异黄酮对鸡小肠黏膜上皮细胞的影响

发布时间：2017-07-29 04:10

  本文关键词：大豆异黄酮对鸡小肠黏膜上皮细胞的影响

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【摘要】：大豆异黄酮(Soy isoflavones,ISO)是一种主要存在于豆科植物中的植物雌激素,在大豆中的含量最高,其主要成分为黄豆苷元、大豆黄素和染料木素。研究表明,ISO具有降血脂、抗肿瘤、抗氧化等多种生理功能。在动物生产中,ISO对动物的免疫功能、生产性能、繁殖性能均具有一定的影响。近年来,有学者指出,大豆异黄酮对小肠的形态和功能有所影响。营养物质的消化和吸收是小肠的主要功能,小肠上皮细胞数量的变化直接影响其消化吸收能力。小肠上皮细胞是由小肠隐窝基底的干细胞分化而来,Notch信号通路在干细胞的分化过程中起着重要的调节作用。本实验运用组织学及组织化学方法,研究了大豆异黄酮对雏鸡小肠黏膜杯状细胞及上皮细胞的影响,运用分子生物学方法,检测了Notch信号通路中受体Notch配体Jagged1和Jagged2以及Hes1基因表达量,探索大豆异黄酮对黏膜上皮细胞影响的机制。选取30只1日龄健康的海兰白鸡,随机平均分为3组,包括两个实验组(A组和B组)和一个对照组(C组),A组和B组日粮中分别添加大豆异黄酮10mg/kg、20mg/kg,对照组饲喂基础日粮。于7日龄进行采样,分别取十二指肠、空肠和回肠,其中一部分用于制作石蜡切片,进行HE和AB-PAS染色,对小肠柱状上皮细胞和杯状细胞进行计数和分析。另一部分冻存于液氮中,用于RNA提取,检测Notch信号通路相关配体和受体基因表达的变化。结果显示,与对照组相比,日粮中添加低剂量大豆异黄酮(10mg/kg)可使小肠黏膜杯状细胞数量增加,但差异不显著。Notch信号通路Notch2受体和Jagged2配体表达受到抑制。添加高剂量大豆异黄酮(20mg/kg)能够显著增加小肠黏膜杯状细胞数量(P0.05),Notch信号通路受体Notch2、配体Jagged1、 Jagged2及Hes1基因表达均受到抑制。大豆异黄酮对柱状上皮的数量没有明显影响。研究结果表明,在饲料中添加大豆异黄酮可使小肠黏膜杯状细胞数量增加,大豆异黄酮可能通过抑制Notch信号相关配体和受体基因的表达对小肠黏膜上皮细胞增殖分化进行调节。该研究为饲料中添加大豆异黄酮提供了理论依据。
【关键词】：雏鸡 大豆异黄酮 小肠 杯状细胞 上皮细胞
【学位授予单位】：福建农林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S831.5
【目录】：

• 缩略词表7-8
• 摘要8-9
• ABSTRACT9-10
• 第一章 文献综述10-26
• 1.1 小肠的结构与功能10-13
• 1.1.1 小肠的结构10-12
• 1.1.2 小肠的功能12
• 1.1.3 小肠黏膜的更新12-13
• 1.2 大豆异黄酮简介13-24
• 1.2.1 大豆异黄酮的结构和理化特性13-14
• 1.2.2 大豆异黄酮的含量14-15
• 1.2.3 大豆异黄酮的生物学特性15-16
• 1.2.4 大豆异黄酮的生理功能16-21
• 1.2.4.1 大豆异黄酮的抗肿瘤作用16-17
• 1.2.4.2 大豆异黄酮对脂肪代谢的调节作用17
• 1.2.4.3 大豆异黄酮抗骨质疏松作用17-18
• 1.2.4.4 大豆异黄酮抗氧化作用18-19
• 1.2.4.5 大豆异黄酮对神经系统的调节作用19
• 1.2.4.6 大豆异黄酮的抑菌作用19-21
• 1.2.5 大豆异黄酮的代谢21-22
• 1.2.6 大豆异黄酮的提取与加工纯化22-23
• 1.2.7 大豆异黄酮对鸡小肠影响的研究现状以及应用前景23-24
• 1.3 NOTCH信号通路与小肠上皮细胞增殖和分化24
• 1.4. 本研究的目的和内容24-26
• 1.4.1 研究的目的和意义24
• 1.4.2 研究的目标和内容24-26
• 第二章 大豆异黄酮对雏鸡小肠形态结构的影响26-41
• 2.1 引言26
• 2.2 材料与方法26-31
• 2.2.1 实验动物26
• 2.2.2 主要器材26-27
• 2.2.3 主要试剂及配制27
• 2.2.4 实验动物饲喂管理及小肠样本采集27-28
• 2.2.5 石蜡切片制作与形态学观察28-29
• 2.2.6 RNA提取29
• 2.2.7 cDNA合成29-30
• 2.2.8 PCR30-31
• 2.2.9 琼脂糖凝胶电泳31
• 2.3 结果31-39
• 2.3.1 大豆异黄酮对雏鸡杯状细胞的影响31-34
• 2.3.2 大豆异黄酮对雏鸡柱状上皮细胞的影响34-36
• 2.3.3 大豆异黄酮对鸡小肠中NOTCH信号相关因子基因表达的影响36-39
• 2.4 讨论39-41
• 第三章 结论和创新点41-42
• 致谢42-43
• 参考文献43-45

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