白藜芦醇对猪精子在常温保存和冷打击过程中的保护作用

发布时间：2017-08-05 18:28

  本文关键词：白藜芦醇对猪精子在常温保存和冷打击过程中的保护作用

  更多相关文章： 猪精子 常温保存 冷打击 白藜芦醇 活性氧自由基

【摘要】：猪精液常温保存是进行人工授精的关键技术,精液保存效果直接关乎精子的品质和受精能力,然而在保存过程中精子会受到活性氧自由基的损伤,影响精子质膜和顶体结构的完整程度及运动能力。此外,猪精子对温度变化敏感,快速降温时易发生冷休克,从而对精子活力、质膜及顶体等产生不可逆的损伤,因此保护剂的添加对于精液品质的保证极为重要。本文以杜洛克公猪精子为试验对象,采用荧光显微镜观察、流式细胞仪检测、扫描电镜观察等方法,研究白藜芦醇对猪精子的保护作用,结果如下:1.在常温保存过程中,精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性在白藜芦醇添加组(50μmol/L)均较对照组高(P0.05),而精子细胞内氧自由基水平(ROS)在白藜芦醇添加组(50μmol/L)较对照组低(P0.05),精子细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性在各处理组间无显著差异(P0.05),表明白藜芦醇在常温保存过程中可以保护精子免受氧化应激。2.在快速降温过程中,精子活力、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活性和总抗氧化能力在白藜芦醇添加组(150μmol/L)均高于对照组(P0.05),同时精子ROS和丙二醛水平较对照组低(P0.05);利用扫描电镜观察发现,精子头部和颈部形态结构完整性在白藜芦醇添加组也优于对照组,表明白藜芦醇可以保护猪精子免受冷打击损伤。综上,在猪精子常温保存和降温过程中白藜芦醇对精子具有一定的保护作用,能够清除猪精子内的活性氧自由基,减弱氧自由基对精子的损伤,提高精子的品质,在常温保存中最佳保护浓度为50μmol/L,在冷打击中最佳保护浓度为150μmol/L。
【关键词】：猪精子 常温保存 冷打击 白藜芦醇 活性氧自由基
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S828
【目录】：

• 摘要6-7
• ABSTRACT7-11
• 文献综述11-26
• 前言11-12
• 第一章 猪精液常温保存的相关研究进展12-22
• 1.1 猪人工授精技术的发展12-13
• 1.2 猪精液的特点13-14
• 1.3 猪精液的体外保存14-15
• 1.4 常温保存15
• 1.5 精液品质的衡量指标15-20
• 1.5.1 精子活力15-16
• 1.5.2 精子质膜完整率16-17
• 1.5.3 精子顶体完整率17
• 1.5.4 精子线粒体活性17-18
• 1.5.5 精子细胞内ROS水平18-19
• 1.5.6 精子细胞内酶活性19-20
• 1.6 精液常温保存的影响因素20-22
• 1.6.1 稀释液20
• 1.6.2 精清20
• 1.6.3 抗生素20-21
• 1.6.4 抗氧化剂21
• 1.6.5 其他物质21-22
• 第二章 白藜芦醇的研究进展22-26
• 2.1 白藜芦醇的来源及作用22-24
• 2.2 白藜芦醇在精液保存的应用24-26
• 试验部分26-49
• 第三章 白藜芦醇在猪精液常温保存中的作用26-40
• 3.1 材料与方法26-30
• 3.1.1 试验动物26
• 3.1.2 主要试验试剂26
• 3.1.3 主要仪器设备26-27
• 3.1.4 主要溶液的配制27
• 3.1.5 精液采集27
• 3.1.6 原精液品质检测27
• 3.1.7 精液的稀释、分装与保存27-28
• 3.1.8 抽检精子的检测28-30
• 3.2 数据处理30
• 3.3 结果与分析30-38
• 3.3.1 猪精子鲜精的状态30-31
• 3.3.2 常温保存过程中白藜芦醇对猪精子活力的影响31-32
• 3.3.3 常温保存过程中白藜芦醇对猪精子质膜完整率的影响32-33
• 3.3.4 常温保存过程中白藜芦醇对猪精子顶体完整率的影响33-35
• 3.3.5 常温保存第5天时白藜芦醇对猪精子内ROS的影响35-36
• 3.3.6 常温保存第5天时猪精子线粒体活性的差异36-37
• 3.3.7 常温保存第5天时白藜芦醇对猪精子细胞内SOD活性的影响37-38
• 3.4 讨论38-40
• 第四章 白藜芦醇对猪精子抗冷打击的影响40-49
• 4.1 材料与方法40-41
• 4.1.1 试验动物40
• 4.1.2 主要试验试剂40
• 4.1.3 主要仪器设备40
• 4.1.4 精子的冷打击处理40
• 4.1.5 精子的检测40-41
• 4.2 数据处理41-42
• 4.3 结果与分析42-46
• 4.3.1 冷打击过程中白藜芦醇对猪精子活力、质膜及顶体完整性的影响42-43
• 4.3.2 冷打击后猪精子细胞内ROS水平、丙二醛水平及总抗氧化能力的差异43-44
• 4.3.3 冷打击后猪精子线粒体活性的差异44-46
• 4.3.4 冷打击后猪精子扫描电镜观察46
• 4.4 讨论46-49
• 结论及创新点49-50
• 结论49
• 创新点49-50
• 参考文献50-57
• 致谢57-58
• 作者简介58

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本文编号：626371