猪流行性腹泻病毒COE蛋白原核表达及其反应原性的初步鉴定

发布时间：2017-08-07 16:02

  本文关键词：猪流行性腹泻病毒COE蛋白原核表达及其反应原性的初步鉴定

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【摘要】：为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的优势抗原表位COE可溶性原核表达及其反应原性,试验采用RT-PCR方法扩增出COE基因,将其克隆至原核表达载体p MAL-C5X上,构建重组质粒p MAL-C5X-COE,经测序鉴定正确后转化Rosetta感受态细胞,并进行IPTG诱导表达和Westernblot验证。结果表明:重组菌p MAL-C5X-COE表达的融合蛋白MBP-COE的分子质量约为57 ku,优化的诱导条件为IPTG浓度0.8 mmol/L、诱导时间4 h,诱导温度30℃,重组蛋白以可溶性蛋白形式存在于菌体中,融合蛋白与兔抗PEDV多克隆抗血清发生特异的免疫印迹反应。说明原核表达的COE融合蛋白可溶且具有良好的反应原性。
【作者单位】： 华南农业大学兽医学院;国家生猪种业工程技术研究中心;
【关键词】： 猪流行性腹泻病毒(PEDV) S基因 逆转录PCR 原核表达 可溶性COE蛋白 免疫印迹反应
【基金】：国家生猪产业技术体系专项(CARS-36) 公益性行业(农业)科研专项(201203039) 广东省科技计划项目(2012A020200014)
【分类号】：S852.651
【正文快照】： 猪流行性腹泻病毒(PEDV)是冠状病毒科冠状病毒属的一员,猪流行性腹泻(porcine epidemic diar-rhea)临床上以猪的急性肠炎、呕吐、腹泻、脱水及哺乳仔猪的高死亡率为特征,对养猪业造成重大的经济损失[1]。猪流行性腹泻病最初在20世纪70年代英国和比利时有报道[2-3]。目前,已经

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本文编号：635467