猪细环病毒2型感染与猪断奶后多系统哀竭综合征的相关性分析
本文关键词:猪细环病毒2型感染与猪断奶后多系统哀竭综合征的相关性分析
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【摘要】:猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)是由猪圆环病毒2型(PCV2)引起的一种多因子疾病,猪细环病毒2型(TTSuV2)具有潜在协同致病性。本研究用荧光定量PCR方法检测PMWS病猪和PCV2亚临床感染猪的血清中PCV2和TTSuV2载量,比较二者之间的差异,分析TTSuV2感染与PMWS发生之间是否存在关联。对原有引物进行调整设计,以原有重组质粒为模板来重新进行检测TTSuV2 DNA的SYBR Green I real-time PCR扩增。结果显示,新的TTSuV2 SYBR Green I荧光定量PCR的扩增效率为99.3%,标准曲线的决定系数为0.998。两种方法在熔解曲线、特异性、重复性方面都基本相同;但新方法在扩增曲线方面得到明显改善,可准确检测的最低核酸模板浓度达到50 copies/μL,可准确定量检测的灵敏度较原方法提高了至少10倍以上,临床检测数据也更加准确可靠。结果表明建立了一种新的准确灵敏度更高的定量检测TTSuV2的SYBR Green I荧光定量PCR方法。采集35头临床疑似PMWS病猪血清和35头同群健康猪血清,PCR方法检出有24头疑似PMWS病猪和27头同群健康猪为PCV2阳性。用SYBR Green I荧光定量PCR方法检测PCV2阳性猪血清中TTSuV2和PCV2的载量。结果显示,PMWS病猪血清中PCV2、TTSuV2载量分别极显著(P0.01)、显著(P0.05)高于PCV2亚临床感染猪,PCV2感染猪的TTSuV2载量与PCV2载量之间存在显著(P0.05)相关性,提示TTSuV2与PMWS的发生可能有关。。研究结果表明,优化了1种TTSuV2 SYBR Green I荧光定量PCR检测方法,临床上TTSuV2感染与PMWS发生之间很可能存在相关性。
【关键词】:猪细环病毒2型 断奶后多系统衰竭综合征 荧光定量PCR 病毒载量 相关性分析
【学位授予单位】:北京农学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:S858.28
【目录】:
- 摘要3-4
- ABSTRACT4-7
- 缩略词表7-8
- 第一章 引言8-12
- 1.1 猪细环病毒的研究概况8-9
- 1.2 猪断奶后多系统衰竭综合征的研究概况9-10
- 1.3 TTSuV2与PMWS发生的关联性10-11
- 1.4 研究目的和意义11
- 1.5 研究内容11-12
- 第二章 猪细环病毒2型荧光定量PCR检测方法的优化12-19
- 2.1 前言12
- 2.2 材料12-13
- 2.3 方法13
- 2.4 结果与分析13-17
- 2.5 讨论17-18
- 2.6 小结18-19
- 第三章 TTSUV2感染与PMWS发生的相关性分析19-25
- 3.1 前言19
- 3.2 材料19-20
- 3.3 方法20-21
- 3.4 结果与分析21-23
- 3.5 讨论23-24
- 3.6 小结24-25
- 第四章 结论25-26
- 参考文献26-30
- 致谢30-31
- 作者简介31
【参考文献】
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,本文编号:648942
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