残缘璃眼蜱的超微观察、鉴定及牛环形泰勒虫病治疗效果分析

发布时间：2017-08-11 22:04

  本文关键词：残缘璃眼蜱的超微观察、鉴定及牛环形泰勒虫病治疗效果分析

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【摘要】：牛环形泰勒虫病是由泰勒科(Theileriidae)泰勒属(Theileria)的环形泰勒虫,以侵袭牛类动物的网状内皮系统细胞和红细胞为特征的一类蜱传性血液原虫病。牛环形泰勒虫病以肩前淋巴结肿大、稽留热、贫血等症状为主要特征,急性病例常死亡;该病在我区发生、流行严重,如吐鲁番、托克逊等疫区发病率可达60%以上,造成巨大经济损失。而目前对于该病的防治仍没有特效药物及疫苗。残缘璃眼蜱是该病的主要传播媒介,因此牛环形泰勒虫病的流行与媒介蜱的出没规律、携带病原虫量有着密切的关系。本研究运用形态学观察和分子生物学的方法对新疆吐鲁番市周边地区部分牛体表及其饲养环境中的残缘璃眼蜱进行了鉴定,并利用三组治疗药物在疫区蹲点治疗了牛环形泰勒虫病病例(N=60),进行治疗效果分析。(Ⅰ)本试验在托克逊县选择约40个养殖户牛场采集其牛体表及其饲养环境中的媒介蜱(N=1088),通过超微观察、进行了蜱种分类鉴定;并通过对璃眼蜱ITS2基因设计通用型引物、PCR扩增与测序,对其进行分子生物学鉴定。结果显示:所采集的1088蜱中368只为残缘璃眼蜱(Hyalomma detritum),齿式3|3;基节?外矩与内矩约等长,外矩末端稍向外弯;爪垫短,约达爪长之半;雄蜱气门板头部近椭圆,背突渐细;PCR扩增出璃眼蜱种属特异性ITS2基因序列大小为518 bp,与GenBank中登录的残缘璃眼蜱(登录号:KC203394.1)ITS2基因序列的相似性为99%。结果表明,残缘璃眼蜱是当地的优势硬蜱种之一;在传统形态学鉴定方法的基础上,采用ITS2基因对已吸血的雌蜱(形态已改变)、若蜱以及形态类似的璃眼蜱属进行分子生物学鉴定具有鉴别性诊断的意义。(Ⅱ)本研究以疫区蹲点治疗其临床病例为目标,通过临床症状观察、病原学检查和PCR检测等方法确诊了60例牛环形泰勒虫病病例,并随机分为4个组;选用3组不同的治疗药物对其进行治疗,即治疗1组(中草药组)、治疗2组(贝尼尔药物组)、治疗3组(黄色素药物组)以及空白对照组。按治疗第1 d、2 d、3 d、4 d、5 d以及一周,分别对每组患牛进行临床症状观察、体温测定、血涂片观察、染虫率统计及治疗效果观察。结果表明,治疗3组治愈率为93.33%(14/15)高于治疗2组治愈率为86.67%(13/15)及治疗1组治愈率为73.33%(11/15),治疗3组与治疗1组复发率为0%(0/15)低于治疗2组复发率为15.38%(2/13);不同组患牛治愈后染虫率方差分析结果显示,对照组与各处方组差异极显著(P0.01),治疗2组、治疗3组分别与治疗1组差异显著(P0.05),治疗3组与治疗2组差异不显著(P0.05)。结果表明,治疗3组的药物(黄色素药物组)是三组药物中治疗牛环形泰勒虫病的最佳药物组;适当配用中草药组药物可对急、慢性牛环形泰勒虫病起到一定的治疗效果,以上治疗数据可为我区牛环形泰勒虫病的防治奠定基础。
【关键词】：环形泰勒虫病 残缘璃眼蜱 超微观察 ITS2基因鉴定 药物治疗
【学位授予单位】：新疆农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.23
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 第1章 牛环形泰勒虫病及其防治现状10-24
• 1.1 牛环形泰勒虫病概要10-16
• 1.1.1 病原学特征10-11
• 1.1.2 生活史11-12
• 1.1.3 牛环形泰勒虫病的流行病学12-13
• 1.1.4 牛环形泰勒虫病的诊断13-16
• 1.2 牛环形泰勒虫病媒介蜱的概况16-19
• 1.2.1 生物学特性16-17
• 1.2.2 危害17-18
• 1.2.3 蜱类DNA序列分析18-19
• 1.3 牛环形泰勒虫病防治现状19-22
• 1.3.1 治疗19-20
• 1.3.2 预防20-22
• 1.4 本课题研究的目的意义22-24
• 第2章 残缘璃眼蜱的超微结构观察及分子生物学鉴定24-34
• 2.1 试验材料24-25
• 2.1.1 蜱虫来源24-25
• 2.1.2 主要仪器25
• 2.1.3 主要试剂25
• 2.2 试验方法25-30
• 2.2.1 样品处理25-26
• 2.2.2 蜱虫DNA的提取26-27
• 2.2.3 引物设计27
• 2.2.4 残缘璃眼蜱ITS2基因的PCR扩增27
• 2.2.5 目的片段回收与纯化27-28
• 2.2.6 标准阳性重组质粒的构建28-30
• 2.3 结果与分析30-32
• 2.3.1 残缘璃眼蜱形态学鉴定结果30-31
• 2.3.2 残缘璃眼蜱分子生物学鉴定结果31-32
• 2.4 讨论与小结32-34
• 第3章 吐鲁番市周边地区牛环形泰勒虫病治疗效果分析34-47
• 3.1 试验材料34-35
• 3.1.1 临床样品来源34
• 3.1.2 主要试剂与药物34-35
• 3.1.3 主要仪器设备35
• 3.2 试验方法35-40
• 3.2.1 临床症状诊断35
• 3.2.2 病原学诊断35
• 3.2.3 分子生物学诊断35-38
• 3.2.4 治疗方案38-40
• 3.2.5 数据处理40
• 3.3 结果与分析40-45
• 3.3.1 临床症状观察结果40-41
• 3.3.2 病原学与分子生物学诊断结果41-42
• 3.3.3 治疗效果观察结果42-44
• 3.3.4 不同治疗组差异分析结果44-45
• 3.4 讨论与小结45-47
• 全文结论47-48
• 参考文献48-57
• 附录57-61
• 致谢61-62
• 作者简历62-63

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本文编号：658399