鸡miR-19a、miR-19b通过靶向抑制LIN9促进前脂肪细胞增殖

发布时间：2017-08-13 10:15

  本文关键词：鸡miR-19a、miR-19b通过靶向抑制LIN9促进前脂肪细胞增殖

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【摘要】：miR-17-92基因簇编码包括miR-19a、miR-19b在内的至少6个miRNA,在鸡细胞的增殖、分化、凋亡及发育等多种生物学过程中发挥重要作用,但其作用机制尚不清楚。生物信息学分析显示,细胞周期调控子LIN9是miR-17-92基因簇成员miR-19a和miR-19b的潜在靶点。为验证这一预测,构建含野生型LIN9 3'-UTR荧光素酶报告基因载体(psi-CHECK2-LIN9-3'-UTR-WT)及突变型报告基因载体(psi-CHECK2-LIN9-3'-UTR-MUT),开展靶标LIN9的鉴定。复合转染结合报告基因酶活性测定结果表明,过表达miR-19a和miR-19b能显著抑制含野生型LIN9 3'-UTR的报告基因表达,而过表达miR-19a和miR-19b抑制剂显著提高野生型LIN9 3'-UTR报告基因的表达。实时定量PCR(RT-q PCR)证明,miR-19a和miR-19b抑制剂对内源性LIN9 mRNA的表达没有影响,提示miR-19a和miR-19b可能不是通过降解mRNA调控LIN9表达。转染结合CCK-8细胞增殖分析显示,在鸡前脂肪细胞过表达LIN9明显抑制细胞增殖。与此相一致的是,细胞增殖标志分子Cyclin D1、c-Myc、PCNA、Ki67的mRNA表达量明显降低。本研究证实,LIN9是miR-17-92基因簇成员miR-19a和miR-19b的靶标,同时证实,LIN9抑制鸡前脂肪细胞的增殖。是否miR-17-92基因簇编码的其它mi-RNA成员也以LIN9为靶标尚不得而知,我室正在研究中。
【作者单位】： 农业部鸡遗传育种重点实验室;黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室;东北农业大学动物科学技术学院;
【关键词】： miR--基因簇 LIN 细胞增殖 鸡前脂肪细胞
【基金】：国家自然科学基金项目(No.31372299) 农业部产业体系(No.CARS-42)资助~~
【分类号】：Q78;S831
【正文快照】： *联系人Tel:0451-55191770;E-mail:wangning@neau.edu.cn##并列第一作者Received:March 7,2016;Revised:May 14,2016;Accepted:May 24,2016Supported by National Natural Science Foundation of China(No.31372299)and Project from Department of Agriculture Technology Sy

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本文编号：666757