ZD制剂对小鼠软组织损伤修复及对RAW264.7炎症因子的影响

发布时间：2017-08-16 05:26

  本文关键词：ZD制剂对小鼠软组织损伤修复及对RAW264.7炎症因子的影响

  更多相关文章： ZD制剂 炎症 软组织损伤 巨噬细胞 细胞因子

【摘要】：ZD制剂是治疗马属动物肢体软组织损伤的经验方剂,在临床应用上取得了较好的疗效。全方由乳香、没药、当归、红花等12味中药组成,通过前期实验表明ZD制剂具有良好的抗炎、镇痛、促消肿的作用,临床上应用于马属动物软组织损伤具有良好的治疗效果。本文建立小鼠急性软组织损伤模型和巨噬细胞炎症模型,观察ZD制剂分别对这两种体内、外模型炎症的治疗效果,确定ZD制剂的抗炎机制。健康的昆明种小鼠,随机分为正常组、模型组、药物对照组和实验药物组。除正常组外,其余各组制备软组织损伤模型,观察小鼠肌肉病理学改变判定造模是否成功。造模1d后开始给予患部涂抹药物,每日2次,给药7 d。在损伤后第2d和7d相同时间点每组随机处取6只小鼠,以打击部位为中心,进行肌肉取材,运用免疫组化法检测小鼠肌肉中IL-1p、IL-6表达情况。通过脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞系建立炎症细胞模型,使用5种不同浓度的ZD制剂进行实验,分别采用Griess反应测定NO水平,ELISA法检测ZD制剂干预前后上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌量。小鼠造模后,肌肉出现淤血、水肿等症状,提示造模成功。经药物干预后,各个给药组小鼠的征候学和病理学有不同程度的改善。小鼠肌肉组织中IL-1β和IL-6的表达量和组织损伤程度均较模型组显著减轻。用ZD制剂干预后,上清液中NO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量与模型组相比均有下降。并存在剂量依赖关系。本实验通过建立体内软组织损伤和体外炎症模型,分别采用免疫组化法、Griess法和ELISA法对ZD制剂的抗炎作用进行了研究,结果表明ZD制剂的体.内外抗炎作用是通过抑制这些炎性介质的表达来实现的。
【关键词】：ZD制剂 炎症 软组织损伤 巨噬细胞 细胞因子
【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S853.74
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-11
• 1 引言11-20
• 1.1 中药治疗软组织损伤的研究进展11-14
• 1.1.1 当代医学对急性软组织损伤的治疗方式11-12
• 1.1.2 中医对急性软组织损伤的治疗方法12-14
• 1.2 炎症14-16
• 1.2.1 炎症介质在炎症过程中的作用14-15
• 1.2.2 中药对炎症的治疗15-16
• 1.3 ZD制剂的研究概况16-18
• 1.3.1 乳香16
• 1.3.2 没药16-17
• 1.3.3 当归17
• 1.3.4 红花17-18
• 1.3.5 其他药物18
• 1.4 研究目的、意义与内容18-20
• 2 ZD制剂对小鼠肌肉软组织损伤修复的影响20-26
• 2.1 材料与方法20-22
• 2.1.1 试验动物20
• 2.1.2 主要试剂20
• 2.1.3 主要仪器20
• 2.1.4 ZD制剂的制备20
• 2.1.5 小鼠软组织损伤造模方法20-21
• 2.1.6 小鼠的分组和治疗21
• 2.1.7 样品的采集21
• 2.1.8 实验小鼠指标检测21-22
• 2.2 实验结果22-24
• 2.2.1 ZD制剂对非开放性软组织损伤小鼠精神活动状态的影响22
• 2.2.2 小鼠肌肉组织病理学指标22-24
• 2.3 讨论24-25
• 2.4 小结25-26
• 3 ZD制剂对小鼠损伤肌肉中细胞因子表达量的影响26-35
• 3.1 材料与方法26-27
• 3.1.1 实验动物26
• 3.1.2 实验试剂26
• 3.1.3 主要仪器26
• 3.1.4 ZD制剂的制备26
• 3.1.5 小鼠软组织损伤造模方法26
• 3.1.6 模型小鼠的分组和治疗26
• 3.1.7 样品的采集26
• 3.1.8 EliVision法检测肌肉组织中细胞因子IL-1β的表达26-27
• 3.1.9 EliVision法检测肌肉组织中细胞因子IL-6的表达27
• 3.1.10 数理统计27
• 3.2 结果27-33
• 3.2.1 ZD制剂对小鼠肌肉组织中细胞因子IL-1β表达的影响27-30
• 3.2.2 ZD制剂对小鼠肌肉组织中细胞因子IL-6表达的影响30-33
• 3.3 讨论33
• 3.4 小结33-35
• 4 ZD制剂对RAW264.7炎症因子的影响35-41
• 4.1 材料与方法35-37
• 4.1.1 细胞35
• 4.1.2 主要试剂与药品35
• 4.1.3 主要溶液配制35
• 4.1.4 主要仪器35-36
• 4.1.5 ZD制剂的制备36
• 4.1.6 细胞培养与分组36
• 4.1.7 细胞毒性的检测36
• 4.1.8 NO的测定36-37
• 4.1.9 TNF-α、IL-1β、IL-6的测定37
• 4.1.10 数据处理及统计37
• 4.2 实验结果37-39
• 4.2.1 ZD制剂对细胞毒性的影响37-38
• 4.2.2 ZD制剂对NO影响38
• 4.2.3 ZD制剂对TNF-α、IL-1、IL-6的影响38-39
• 4.3 讨论39-40
• 4.4 小结40-41
• 5 结论41-42
• 致谢42-43
• 参考文献43-48
• 作者简介48

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