猪血凝性脑脊髓炎病毒重组N蛋白间接ELISA检测方法的建立与应用

发布时间：2017-08-19 08:20

  本文关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒重组N蛋白间接ELISA检测方法的建立与应用

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【摘要】：为建立检测猪血凝性脑脊髓炎病毒(porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV)血清抗体的间接ELISA方法,构建了高效表达PHEV核衣壳蛋白(N)的重组质粒(pET28a-N),Western blot检测该重组蛋白具有较好的免疫原性。以纯化的N重组蛋白作为包被抗原,通过方阵试验确定了抗原的最适包被浓度为2mg/L,酶标二抗的最佳稀释倍数为1∶10 000,建立了用于PHEV抗体检测间接ELISA方法。此外,用该法(N-ELISA)对天津市地区采集到的200份猪血清样品进行检测,阳性检出率为83.5%,与前期工作中建立的全病毒作为包被抗原的间接ELISA诊断方法 (HEV-ELISA)检测结果的符合率为90.91%。结果表明:以重组N蛋白为包被抗原所建立的用于PHEV血清抗体检测的方法能够用于检测PHEV感染及相关的流行病学调查。
【作者单位】： 吉林大学动物医学学院;天津市动物卫生监督所;
【关键词】： 猪血凝性脑脊髓炎病毒 重组N蛋白 间接ELISA 血清抗体
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31272530) 国家重点研发计划资助项目(2016YFD0500707) 吉林省青年科研基金资助项目(20160520033JH)
【分类号】：S852.65
【正文快照】： *Corresponding author,E-mail:gf86661@sohu.com猪血凝性脑脊髓炎病毒(porcine hemagglutina-ting encephalomyelitis virus,PHEV)属于冠状病毒科β-冠状病毒属成员,为不分段的单股正链RNA病毒,可引起仔猪发生猪血凝性脑脊髓炎(porcinehemagglutinating encephalomyelitis,PH

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本文编号：699640