番鸭呼肠孤病毒σC基因重组腺病毒载体的构建和鉴定
本文关键词:番鸭呼肠孤病毒σC基因重组腺病毒载体的构建和鉴定
【摘要】:应用RT-PCR方法扩增出番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus,MDRV)的σC基因,通过XhoⅠ+HindⅢ双酶切后把该基因插入到经过同样双酶切的穿梭质粒pShuttle-CMV载体中。重组穿梭载体经过双酶切和PCR鉴定后进行测序,序列测定正确,同源性为99.8%。将获得的重组穿梭质粒与腺病毒骨架质粒共转染293细胞后获得重组腺病毒。PCR和RT-PCR鉴定的结果证明σC蛋白基因已成功插入到重组腺病毒载体中。
【作者单位】: 福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心;
【关键词】: 番鸭呼肠孤病毒 σC基因 重组腺病毒载体
【基金】:国家自然科学基金项目(31172334) 福建省自然科学基金项目(2016J01137)
【分类号】:S852.65
【正文快照】: 番鸭呼肠孤病毒病首次报道于南非(1950年),1972年法国学者Gaudry等在国际上首次从患病番鸭中分离到番鸭呼肠孤病毒,随后该病相继在以色列、意大利、德国等国暴发[1-3]。该病于1997年在我国爆发,近年来在福建、广东、浙江、河南等省份传播。该病发病于7~45日龄番鸭,尤以10~20日
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