Actigen（奇力素）对断奶仔猪生产性能及肠道屏障功能的影响

发布时间：2017-09-05 03:12

  本文关键词：Actigen（奇力素）对断奶仔猪生产性能及肠道屏障功能的影响

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【摘要】：早期断奶引发的腹泻是仔猪生产中亟待解决的问题,由多种因素引起的肠道屏障功能损伤是断奶仔猪腹泻的共同病症和内因。因此,提高断奶仔猪肠道健康,减少断奶仔猪腹泻,对于提高断奶仔猪的生产水平和效率具有重要的意义。本试验的目的是研究Actigen(第二代甘露寡糖提取物,富含甘露寡糖片段)对仔猪生产性能及肠道屏障功能的影响。试验选取150头30日龄健康状况良好且体重相近的三元杂断奶仔猪,称重编号后随机分为三组:对照组饲喂基础日粮(不含抗生素和Actigen),抗生素组饲喂基础日粮添加100 mg/kg抗生素,Actigen组饲喂基础日粮添加800 mg/kg Actigen,每组设5个重复,每个重复10头猪。试验开始前预饲一周,正式试验时间为28天,试验期间断奶仔猪为自由采食及饮水,每天记录仔猪的采食量并观察其腹泻状况。试验结束后称重,每组随机选取10头断奶仔猪进行屠宰采样,采集断奶仔猪血液,十二指肠、空肠、回肠的内容物、黏膜及肠道组织样用于后期试验检测。采用生化试剂盒检测断奶仔猪血清中蛋白含量、糖脂代谢和氮代谢相关指标及回肠内容物二糖酶(蔗糖酶、乳糖酶、麦芽糖酶)活性;利用ELISA和RIA法检测断奶仔猪血清中内毒素、D-乳酸、二胺氧化酶含量、回肠黏膜sIgA及炎症因子的水平;HE染色观察断奶仔猪肠道形态,PAS法观察断奶仔猪肠黏膜黏液分泌情况;采用Western blot检测断奶仔猪肠道紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1及炎症通路相关蛋白(TLR4、MyD88、p-IKKβ、p-JNK)的表达量;提取断奶仔猪肠道内容物菌群16S rDNA和肠黏膜RNA后利用荧光定量PCR技术对断奶仔猪肠道微生物菌群分布情况及断奶仔猪回肠黏膜炎症因子mRNA表达水平进行检测。研究结果表明:1.Actigen对断奶仔猪生产性能及腹泻率的影响。与对照组相比,Actigen能与抗生素一样达到显著降低仔猪腹泻率的效果(p0.05)。2.Actigen对断奶仔猪肠道物理屏障的影响。与对照组相比,Actigen和抗生素均能够显著降低断奶仔猪血清中内毒素水平(p0.05),而抗生素能够显著增加断奶仔猪血清中D-乳酸的含量(p0.05);HE染色结果显示,与抗生素相比,Actigen能显著增加断奶仔猪小肠绒毛的高度,降低隐窝深度,显著增加绒毛高度与隐窝深度的比值(p0.05);Western blot结果显示,与对照组和抗生素组相比,Actigen能够显著促进断奶仔猪十二指肠、空肠紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin)及回肠黏膜紧密连接蛋白Occludin的表达量(p0.05)。以上结果表明,Actigen能够增强断奶仔猪肠道的物理屏障功能。3.Actigen对断奶仔猪肠道化学屏障的影响。与对照组相比,Actigen有降低断奶仔猪十二指肠内容物pH值的趋势(p=0.053);PAS染色结果显示,Actigen能够显著增加断奶仔猪空肠黏膜杯状细胞的数量,促进肠黏膜黏液的分泌;Actigen还能够显著增加断奶仔猪回肠内容物中乳糖酶的活性,且与抗生素组相比,Actigen能显著增加回肠内容物中蔗糖酶和麦芽糖酶的活性(p0.05)。这说明Actigen能够通过调节肠道内容物pH值及消化酶活性,促进肠道营养物质的消化吸收。4.Actigen对断奶仔猪肠道生物屏障的影响。对断奶仔猪回肠内容物菌群的检测结果显示:与对照组相比,Actigen能显著增加肠道总菌和大肠杆菌的数量(p0.05);抗生素可显著抑制沙门氏菌和乳酸杆菌的增殖(p0.05),且有增加回肠双歧杆菌的趋势(p=0.079)。5.Actigen对断奶仔猪肠道免疫屏障的影响。对断奶仔猪血清炎症因子水平及回肠黏膜炎症因子mRNA表达水平的检测结果显示:添加Actigen和抗生素均能显著降低断奶仔猪血清中促炎因子TNF-α的含量(p0.05),且Actigen的作用效果更为明显。Actigen还能显著增加断奶仔猪血清中抗炎因子IL-10的含量(p0.05)。与对照组相比,Actigen能够显著提高断奶仔猪回肠黏膜抗炎因子IL-4、IL-10 mRNA的表达量(p0.05)。对断奶仔猪回肠黏膜炎症通路相关蛋白的检测结果显示:与对照组相比,在日粮中添加抗生素显著增加断奶仔猪回肠黏膜炎症蛋TLR4、MyD88、p-IKKβ的表达量(p0.05)。且与抗生素组相比,添加Actigen能显著降低断奶仔猪回肠黏膜炎症蛋白TLR4、MyD88、p-IKKβ的表达量(p0.05)。综上所述:Actigen能够通过调节断奶仔猪肠黏膜紧密连接蛋白的表达和肠黏膜黏液的分泌、改善肠道形态结构的完整性。同时,Actigen还可增加断奶仔猪回肠内容物二糖酶的活性,降低断奶仔猪血清中促炎因子水平及回肠黏膜炎症通路蛋白的表达量。因此,Actigen能够改善断奶仔猪肠道健康,这为Actigen替代抗生素应用于养猪业生产的可行性提供了科学依据。
【关键词】：Actigen 抗生素 断奶仔猪 肠道屏障功能 紧密连接蛋白 炎症因子
【学位授予单位】：华南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S828.5
【目录】：

• 摘要3-5
• Abstract5-8
• 英文缩写词表8-11
• 1 前言11-17
• 1.1 断奶仔猪肠道屏障功能的重要性及其调控11-13
• 1.2 甘露寡糖与Actigen的简介13-14
• 1.3 甘露寡糖的生理作用14-15
• 1.4 本研究的目的及意义15-17
• 2 材料与方法17-33
• 2.1 试验材料及场地17
• 2.2 试验动物及方案设计17
• 2.3 饲粮配方及营养水平17-18
• 2.4 主要仪器设备18
• 2.5 试验相关耗材及试剂盒18-19
• 2.6 试验主要试剂的配制19-20
• 2.7 试验检测指标及方法20-32
• 2.7.1 生产性能20
• 2.7.2 血清中相关生化指标的检测20-23
• 2.7.3 肠道黏膜炎症因子mRNA表达水平的检测23-26
• 2.7.4 肠道内容物二糖酶（乳糖酶、蔗糖酶、麦芽糖酶）活性的检测26
• 2.7.5 肠道微生物菌群的绝对定量检测26-30
• 2.7.6 WB检测肠道紧密连接蛋白的表达30-31
• 2.7.7 肠道组织石蜡切片的HE染色及PAS染色31-32
• 2.8 数据分析32-33
• 3 试验结果与分析33-43
• 3.1 Actigen对断奶仔猪生产性能及腹泻率的影响33
• 3.2 Actigen对断奶仔猪血清中蛋白、糖脂代谢及氮代谢相关指标含量的影响33-34
• 3.3 Actigen对仔猪肠道物理屏障功能的影响34-38
• 3.3.1 Actigen对断奶仔猪肠道形态完整性的影响34-35
• 3.3.2 Actigen对断奶仔猪血清中内毒素、D-乳酸和二胺氧化酶含量的影响35-36
• 3.3.3 Actigen对断奶仔猪肠道紧密连接蛋白表达的影响36-38
• 3.4 Actigen对断奶仔猪肠道化学屏障功能的影响38-40
• 3.4.1 Actigen断奶对仔猪肠道内容物pH的影响38
• 3.4.2 Actigen对断奶仔猪小肠黏膜黏多糖分泌量的影响38-39
• 3.4.3 Actigen对断奶仔猪回肠内容物二糖酶活性的影响39-40
• 3.5 Actigen对断奶仔猪回肠微生物菌群分布的影响40
• 3.6 Actigen对断奶仔猪肠道免疫屏障功能的影响40-43
• 3.6.1 Actigen对断奶仔猪炎症因子表达和分泌的影响40-41
• 3.6.2 Actigen对断奶仔猪回肠黏膜sIgA含量的影响41
• 3.6.3 Actigen对断奶仔猪回肠黏膜炎症通路相关蛋白表达的影响41-43
• 4 讨论43-48
• 4.1 Actigen对断奶仔猪生产性能及腹泻率的影响43
• 4.2 Actigen对断奶仔猪血清蛋白、糖脂代谢及氮代谢相关指标的影响43-44
• 4.3 Actigen对断奶仔猪肠道物理屏障功能的影响44-46
• 4.4 Actigen对断奶仔猪肠道内容物pH值、二糖酶活性及肠道黏液分泌量的影响46-47
• 4.5 Actigen对断奶仔猪肠道微生物的影响47
• 4.6 Actigen对断奶仔猪肠道免疫屏障功能的影响47-48
• 5 结论48-50
• 致谢50-51
• 参考文献51-54

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本文编号：795476