猪圆环病毒2型Cap蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及在小鼠体内免疫特性研究

发布时间：2017-09-14 10:48

  本文关键词：猪圆环病毒2型Cap蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及在小鼠体内免疫特性研究

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【摘要】：猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白基因是该病毒基因工程疫苗的重要目的基因,但其在大肠杆菌表达系统中的表达产物通常以包涵体形式存在,影响其作为亚单位疫苗使用的免疫保护作用。将ORF2基因密码子改造为大肠杆菌偏爱的密码子,或构建MPG与ORF2基因融合,分别克隆至表达载体p ET28a,再转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Western blot结果证实改造后的PCV2 Cap蛋白基因实现了可溶性表达。将上述两种重组蛋白纯化后,分别与GEL01、ISA206或ISA15A三种佐剂混合配制疫苗,小鼠免疫保护试验结果证明,以GEL01为佐剂的两免疫组PCV2 ELISA抗体和中和抗体水平最高。攻毒试验结果显示,除ISA15A组外,其他各免疫组脾脏中PCV2含量都显著低于非免疫对照组,表明两种重组蛋白与佐剂GEL01和ISA206制成的疫苗可诱导产生一定水平的免疫保护作用,为PCV2亚单位疫苗的研制奠定了基础。
【作者单位】： 南京农业大学动物医学院;
【关键词】： PCV Cap蛋白 可溶性表达 免疫特性
【基金】：农业部行业专项子项目(201203039) 国家生猪产业技术体系专项(CARS-36) 江苏省科技支撑计划(BE2012368) 江苏省教育厅产业发展项目(JH09-1)资助项目
【分类号】：S852.651
【正文快照】： 猪圆环病毒2 型( PCV2) 是断奶仔猪多系统衰竭综合征( PMWS) 的重要病原体,它的存在和流行给世界养猪业造成了巨大损失[1-3]。PCV2 属于圆环病毒科圆环病毒属,为无囊膜单股环状DNA病毒,是目前发现的最小的动物病毒。PCV2 基因组全长为1 767 bp或1 768 bp,含有11 个开放阅读框(

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