猪瘟疫苗毒株和流行毒株RT-nPCR检测方法的建立

发布时间：2017-09-17 18:33

  本文关键词：猪瘟疫苗毒株和流行毒株RT-nPCR检测方法的建立

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【摘要】：为给临床快速鉴别诊断猪瘟提供技术依据,根据GenBank公布的CSFV全基因序列,结合猪瘟序列测定结果,针对NS5B基因区域设计2条通用外扩引物、2条通用内扩引物和1条疫苗毒株特异性内扩引物,建立一种可鉴别猪瘟疫苗毒株和流行毒株的RT-nPCR诊断方法。结果显示,该方法可从HCLV株扩增出2条大小分别为261bp和157bp的片段,可从Shimen、SXYL2006、GX54和SD2002等流行毒株扩增出1条261bp的片段,其他几种常见猪病毒检测均呈阴性;灵敏度试验表明,检测的cDNA质量浓度极限为3.4×10-7 pg/L;116份临床样品中有37份样品检测呈阳性,阳性率为32%;分析部分阳性病料E2基因序列也证实检测结果的准确性。说明:建立的RT-nPCR鉴别诊断方法灵敏度高、特异性好,能直观区分猪瘟疫苗毒株和流行毒株。
【作者单位】： 咸阳职业技术学院畜牧兽医研究所动物疫病分子生物学诊断实验室;
【关键词】： 猪瘟 反转录-复合套式聚合酶链式反应 鉴别诊断
【基金】：陕西省科学技术研究发展计划(2014K02-06-03) 咸阳市科学技术研究计划(2014K02-21)~~
【分类号】：S852.651
【正文快照】： 猪瘟(Classical swine fever,CSF)是一种高度接触性传染病,其病原为猪瘟病毒(Classicalswine fever virus,CSFV),猪和野猪是其唯一宿主[1]。关于CSF的报道最早可追溯至19世纪早期,该病一直是严重危害养猪业的烈性传染病,中国农业部将其列为一类动物疫病。CSFV属黄病毒科,瘟病

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本文编号：871045