羊口疮病毒陕西分离株B2L基因的克

发布时间：2017-09-18 05:19

  本文关键词：羊口疮病毒陕西分离株B2L基因的克隆、序列分析及原核表达

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【摘要】：为了对羊口疮病毒(ORFV)陕西分离株B2L基因进行克隆、序列分析及原核表达,根据GenBank已登录的ORFV(JN565694.1)B2L基因序列,设计合成一对特异性引物,应用PCR技术扩增ORFV B2L基因,并将目的基因连接到原核表达载体pET-28a中,成功构建重组质粒PET28a-B2L,转化大肠埃希菌BL21感受态细胞进行诱导表达,并进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果表明,成功克隆了ORFV陕西分离株B2L全基因序列,核苷酸序列分析表明,陕西分离株B2L基因与国内外已报道的ORFV毒株核苷酸同源性超过97.3%,氨基酸同源性超过95.0%。重组菌经IPTG诱导后成功表达分子质量约为42ku的重组蛋白,该蛋白能与羊口疮阳性血清特异性结合,具有良好的反应原性。研究结果为ORFV的分子生物学特性研究提供资料,为进一步研制ORFV单克隆抗体及抗体检测ELISA试剂盒奠定了基础。
【作者单位】： 西北农林科技大学动物医学院;
【关键词】： 羊口疮病毒 BL基因 克隆 序列分析 原核表达
【基金】：陕西省重点产业创新链项目(2016KTZDNY02-06) 陕西省农业科技创新与攻关项目(2016NY-092) 西北农林科技大学试验示范站(基地)科技成果推广项目(TGZX2015-32)
【分类号】：S852.654
【正文快照】： 羊口疮(Orf)又称羊接触传染性脓疱皮炎(Con-tagious pustular dermatitis),是由羊口疮病毒(Orfvirus,ORFV)引起的一种急性接触性人兽共患传染病,我国将其列为三类动物疫病[1-2]。羊口疮病毒属于痘病毒科副痘病毒属,病毒粒子大小约为280nm×170nm,一般呈椭圆形,也有球形、锥形

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本文编号：873618