水牛bbu-miR-103-1在泌乳期与非泌乳期表达模式及靶向基因的初步研究

发布时间：2017-09-22 02:17

  本文关键词：水牛bbu-miR-103-1在泌乳期与非泌乳期表达模式及靶向基因的初步研究

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【摘要】：旨在探讨bbu-miR-103-1在水牛泌乳期和非泌乳期的差异表达模式,并预测其靶向调控基因及功能。本研究应用qRT-PCR检测bbu-miR-103-1,在水牛泌乳期和非泌乳期的差异表达。构建bbu-miR-103-1前体表达质粒LpEZX-pre-miR-103-1,并在293T细胞中包装高滴度的慢病毒颗粒,用于感染水牛乳腺上皮细胞实现过表达bbu-miR-103-1,同时应用化学合成的bbu-miR-103-1抑制剂转染水牛上皮细胞实现抑制表达bbu-miR-103-1,研究bbu-miR-103-1对PANK3及乳脂代谢相关基因表达的影响。结果表明,水牛泌乳期bbu-miR-103-1的相对表达量为非泌乳期的5.29倍(P0.01);成功构建的慢病毒载体LpEZX-pre-miR-103-1包装获得了感染滴度为3.47×106PFU·mL-1的慢病毒颗粒;过表达和抑制表达bbu-miR-103-1分别极显著下调和上调了水牛乳腺上皮细胞PANK3基因的相对表达量(P0.01);过表达bbu-miR-103-1极显著提高了ACACA、GPAM、DGAT1和PDK4基因的表达(P0.01),对SREBP1c、ADFP、CD36、ACSS1等基因产生了显著的上调作用(P0.05)。过表达bbu-miR-103-1通过下调PANK3的表达,反馈提高了SREBP1c的mRNA水平,促进了以ACACA开头的脂肪酸从头合成。表明bbu-miR-103-1对水牛乳脂肪合成有十分重要的促进作用,为揭示水牛高乳脂形成和调控机理提供了分子依据。
【作者单位】： 广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室;广西壮族自治区畜牧研究所;
【关键词】： 水牛 bbu-miR-- 表达模式 PANK
【基金】：国家自然科学基金(31260552) 国家高技术研究发展计划(863计划)(2011AA100607) 优势生态牧草品种遴选及果草耦合系统碳氮源汇的研究与示范(桂科合14125008-2-13) 国审牧草新品种紫色象草的繁育与推广(桂渔牧科201453057)
【分类号】：S823.83
【正文快照】： 小的非编码RNA分子miRNA,大小为18~25nt个核苷酸,由生物体自身的基因转录而成,在转录后和转录前水平上参与基因表达的调控[1-3]。据估算,miRNA可能对所有哺乳动物的2%~5%的基因负责,调节多达60%的蛋白编码基因[4]。miR-NA通过与靶mRNA的碱基互补配对,使靶mRNA降解或者沉默从而

【参考文献】

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本文编号：898216