猪圆环病毒2型CAP蛋白在杆状病毒系统中的表达和鉴定
本文关键词:猪圆环病毒2型CAP蛋白在杆状病毒系统中的表达和鉴定
【摘要】:为更好地检测和防控猪圆环病毒2型(PCV2),利用bac PAK杆状病毒系统高效表达了PCV2 CAP蛋白。应用PCR扩增PCV2 ORF2基因,并将其克隆到载体pbac PAK9中,获得重组载体pbac PAK9-ORF2。用脂质体介导法将其与线性化杆状病毒bac PAK6共转染于Sf21细胞中,经蚀斑纯化获得纯的重组杆状病毒,并于优化表达条件后获得CAP蛋白。SDS-PAGE分析表明,CAP蛋白分子质量约为28 ku,表达量约为33 mg/L;间接ELISA试验表明,CAP蛋白与PCV2阳性血清产生特异性免疫反应,具有良好的反应原性。上述结果表明,本研究用杆状病毒系统高效表达了PCV2 CAP蛋白,为PCV2的分子诊断及亚单位疫苗的研制奠定了基础。
【作者单位】: 北京世纪元亨动物防疫技术有限公司;中国动物疫病预防控制中心;
【关键词】: 猪圆环病毒型 重组杆状病毒 CAP蛋白
【分类号】:S852.651
【正文快照】: 猪圆环病毒(PCV)为圆环病毒科、圆环病毒属的DNA病毒。根据基因序列、致病性和抗原性的差异,可将猪圆环病毒分成PCV1和PCV2两个型[1]。PCV1对猪没有致病性;PCV2能引起断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪呼吸系统混合疾病、猪繁殖障碍、增生性坏死性肺炎等[2-4]。PCV2在我国规模化猪
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,本文编号:907966
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