牛MYOZ2基因启动子克隆及活性分析

发布时间：2017-09-26 14:43

  本文关键词：牛MYOZ2基因启动子克隆及活性分析

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【摘要】：旨在克隆测定牛肌原调节蛋白2基因(Myozenin2,MYOZ2)启动子的全长序列,进行活性区域分析,为牛MYOZ2基因功能和表达调控机理研究提供理论依据。通过5′RACE方法确定牛MYOZ2基因转录起始位点;采用PCR技术,以牛基因组为模板克隆MYOZ2基因启动子序列。利用在线软件分析启动子区域中可能包含的转录因子结合位点。依据分析结果重新设计引物,构建7个包含不同缺失片段的双荧光素酶报告基因载体,转染C2C12细胞系,利用双荧光素酶系统检测不同片段的启动子活性。结果表明,克隆得到牛MYOZ2基因启动子序列2 065bp,确定MYOZ2基因的转录起始位点;MYOZ2基因片段-84/+125荧光素酶相对活性极显著高于空载体pGL3-Basic(P0.01),MYOZ2基因片段-683/+125荧光素酶相对活性极显著高于基因片段-263/+125(P0.01)。MYOZ2基因启动子核心区域位于-84/+125bp,而且MEF2,SRF,MyoD,YY1等转录因子可能参与MYOZ2基因的转录调控。
【作者单位】： 西北农林科技大学动物科技学院;国家肉牛改良中心;
【关键词】： 牛 肌原调节蛋白基因启动子 基因克隆 活性分析 ′RACE
【基金】：国家“863”计划(2013AA102505) 国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-38) “十二五”国家科技支撑计划(2011BAD28B04-03) 陕西省科技统筹创新工程计划(2014KTZB02-02) 新疆建设兵团重大科技计划(2014AA001-1)
【分类号】：S823
【正文快照】： 随着人们生活水平的提高,消费者对肉质品质的要求也越来越高。影响肉品质的因素很多,其中肌肉嫩度是影响肉质品质的重要因素,而肌纤维的类型直接影响肌肉嫩度[1]。肌肉中慢肌纤维比例越大,肉品质就会越好[2]。研究发现,MYOZ2基因在心肌和骨骼肌慢肌纤维中特异性表达[3],而且MY

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