儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染临床及分子学特征研究

发布时间：2017-10-12 04:22

  本文关键词：儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染临床及分子学特征研究

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【摘要】：目的了解上海地区儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染临床及分子学特征；同时探讨临床分离的MRSA对抗菌药物耐药情况与耐药基因携带情况的关系。 方法采用队列研究方法,对复旦大学附属儿科医院2009年3月至2011年11月MRSA感染住院患儿的临床特征进行分析；采用纸片琼脂扩散法药敏试验检测MRSA对常用抗菌药物的耐药性；采用聚合酶链式反应(PCR)检测β内酰胺类抗生素耐药基因mecA、大环内酯类抗生素耐药基因ermB、氨基糖苷类抗生素耐药相关基因[aac (6')/aph (2")、aph (3')-Ⅲ、ant (4',4")]、耐消毒剂基因qacA在MRSA菌株的携带率,并检测杀白细胞素(PVL)基因在MRSA菌株的阳性率；多重PCR法检测MRSA SCCmec分型。 结果(1)37株MRSA中,56.80%(21株)来源于医院(HA-MRSA),43.20%(16株)来源于社区(CA-MRSA)。MRSA感染以呼吸道感染最常见,分布以重症监护病房最多。CA-MRSA感染可引起皮肤软组织感染、化脓性扁桃体炎等,严重者亦可引起肺炎、败血症等,而HA-MRSA感染更具侵袭性,其多引起肺炎、败血症,亦可引起脑膜炎。HA-MRSA与CA-MRSA感染所致发热患儿中,HA-MRSA感染者表现出更长的热程(10.50天)。炎症指标方面,HA-MRSA感染患儿C反应蛋白(63.00mg/L)较CA-MRSA(9.50mg/L)高,其差异具有统计学意义(P=0.015),而两者的外周血白细胞计数、降钙素原差异无统计学意义。 (2)37株MRSA中,SCCmec分型以SCCmecⅢ型最多见,共17株(45.95%),其次是SCCmecⅣ型8株(21.62%),SCCmecⅡ型1株(2.70%),未分型11株(29.73%),未发现SCCmecⅠ、Ⅴ型。其中,在21株HA-MRSA中,SCCmecⅢ型最多见,为15株(71.42%),SCCmecⅣ型1株(4.76%),未分型者5株(23.82%)；在16株CA-MRSA中,SCCmecⅣ型最多见,为7株(43.75%),ⅡI型2株(12.50%),II型1株(6.25%),未分型者6株(37.50%)。37株MRSA菌株PVL基因检出率为75.70%,在HA-MRSA中为80.95%,在CA-MRSA中为68.75%,两者差异无统计学意义(P=0.458)。 (3)37株MRSA对青霉素、优立新、头孢唑啉、头孢呋辛耐药率均为100%;对庆大霉素、红霉素、克林霉素、复方磺胺类、磷霉素、利福平、左氧氟沙星耐药率分别为51.35%(19/37)、81.08%(30/37)、51.35%(19/37)、16.22%(6/37)、27.03%(10/37)、37.84%(14/23)、54.05%(20/37)；而对壁霉素、万古霉素、利奈唑胺的耐药率均为0.00%。其中,16株CA-MRSA对庆大霉素、红霉素、克林霉素、复方磺胺类、磷霉素、利福平、左氧氟沙星耐药率分别为12.50%、75.00%、62.50%、12.50%、12.50%、6.25%、31.25%；21株HA-MRSA对庆大霉素、红霉素、克林霉素、复方磺胺类、磷霉素、利福平、左氧氟沙星耐药率分别为80.95%,85.71%,42.86%,19.05%,38.10%,61.90%,71.43%；通过统计学检验,对于庆大霉素、左氧氟沙星以及利福平的耐药性,HA-MRSA明显高于CA-MRSA,其差异具有统计学意义(P=0.000、0.015、0.001)。 (4)37株MRSA菌株中,β内酰胺类抗生素耐药基因mecA基因阳性37株(100%),大环内酯类抗生素耐药基因ermB阳性9株(24.30%),氨基糖苷类抗生素耐药基因aac (6')/aph (2")阳性21株(56.80%),aph(3’)-Ⅲ阳性10株(27.00%),ant(4’,4”)阳性6株(16.20%),耐消毒剂基因qacA阳性9株(24.30%)。其中,在16株CA-MRSA中,ermB、aac(6')/aph(2")、aph (3')-Ⅲ、ant(4’,4”)、QacA的检出率分别为25.00%、18.75%、31.25%,25.00%,25.00%；在21株HA-MRSA中,ermB、aac(6')/aph (2")、aph (3')-Ⅲ、ant (4',4")、 QacA的检出率分别为23.81%、85.71%、23.81%、9.52%、23.81%；通过统计学检验,对于aac(6')/aph(2")的检出率,HA-MRSA明显高于CA-MRSA,其差异具有统计学意义(P=0.000)。在氨基糖苷类耐药基因中,最常见基因组合为aac (6')/aph (2")与aph(3’)-Ⅲ基因,共6株(16.20%),其次是aac(6')/aph(2")与ant(4’,4”)基因,共2株(5.40%),aph(3’)-Ⅲ与ant(4’,4”)基因共1株(2.70%),而aac (6')/aph (2")、aph (3')-Ⅲ、ant (4',4")均携带株1株(2.70%)。 (5)通过对MRSA临床耐药情况与耐药基因携带情况的对比分析可知,ermB基因携带株对红霉素的耐药率并没有明显高于未携带株,其差异无统计学意义(P=0.160); aac (6')/aph (2")基因携带株对庆大霉素的耐药率明显高于未携带株,其差异具有统计学意义(P=0.000),而aph(3’)-Ⅲ基因及ant(4’,4”)基因的携带株对庆大霉素的耐药率并没有比未携带株更高,其差异无统计学意义(P=0.920、0.405)。 结论HA-MRSA与CA-MRSA相比,其感染更具侵袭性,所致炎性指标(C反应蛋白)更高；CA-MRSA主要为SCCmecⅣ型,而HA-MRSA主要为SCCmecⅢ型,PVL毒力基因携带率较高。儿童临床分离的MRSA携带多种耐药基因,表现出多重耐药性,HA-MRSA与CA-MRSA相比,其对抗菌药物耐药率更高,耐药基因携带率亦更高。MRSA携带mecA基因是其对β内酰胺类抗生素耐药的主要机制,携带aac(6')/aph(2")基因是其对氨基糖苷类抗生素耐药的重要机制之一
【关键词】：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 临床特征 分子学特征 抗生素耐药 儿童
【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R725.1
【目录】：

• 摘要4-7
• Abstract7-10
• 引言10-12
• 第一部分：儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染临床特征及SCCmec分型、PVL基因检测12-22
• 1 材料与方法12-15
• 1.1 主要仪器12
• 1.2 主要试剂及耗材12-13
• 1.3 主要试剂配制13
• 1.4 菌株来源13
• 1.5 方法13-15
• 1.6 诊断标准15
• 2 结果15-19
• 2.1 MRSA感染类型及标本来源15-16
• 2.2 MRSA感染的年龄、性别分布16
• 2.3 MRSA感染的科室分布16-17
• 2.4 MRSA感染的临床表现17-18
• 2.5 MRSA感染炎性指标18
• 2.6 SCCmec分型检测及mecA、PVL基因检测18-19
• 3 讨论19-22
• 第二部分：儿童MRSA临床耐药与耐药基因情况的研究22-30
• 1 材料与方法22-23
• 1.1 主要仪器及试剂耗材22
• 1.2 菌株来源22
• 1.3 方法22-23
• 1.4 诊断标准23
• 2 结果23-27
• 2.1 临床耐药情况23-24
• 2.7 耐药基因检测情况24-26
• 2.8 耐药情况与耐药基因携带关系26-27
• 3 讨论27-30
• 结论30
• 创新点30-31
• 参考文献31-36
• 附录36-43
• 综述一36-40
• 参考文献38-40
• 综述二40-43
• 参考文献42-43
• 研究生期间完成论著43-44
• 论著44-56
• 参考文献52-56
• 致谢56-57

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 周宏;康海全;任玲;韩方正;茅一平;;MRSA医院感染的特点及预防措施的研究[J];中华全科医学;2009年10期

2 糜祖煌;金辉;秦玲;;葡萄球菌属连续分离株毒力与耐药基因研究[J];中华医院感染学杂志;2008年04期

3 陈庆增;罗兵;孙迎娟;黄伟丽;秦萍;;mecA基因在金黄色葡萄球菌中的分布及对耐药性的影响[J];中华医院感染学杂志;2009年09期

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本文编号：1016616